产品参数:
产品名称: 人ACTB基因检测试剂盒(荧光PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64083
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进��,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
![](https://yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202108/202108051515218291.png)
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
溶杆菌皮质素1抗体Human GLP2(Glucagon Like Peptide 2) ELISA Kit人前列腺素E1(PGE1)试剂盒
串珠镰刀菌8号染色体开放阅读框70抗体Human GLUT2(Glucose Transporter 2) ELISA Kit人前列腺素D合成酶(PGDS)试剂盒
氧化微杆菌胰羧肽酶E抗体Human GKN1(Gastrokine 1) ELISA Kit人前列腺素D2(PGD2)试剂盒
菌核青霉磷酸化角蛋白18抗体Human GLUT4(Glucose Transporter 4) ELISA Kit人前列腺素A1(PGA1)试剂盒
类芽孢杆菌20号染色体开放阅读框112抗体Human GM-CSF Ab(Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit人前列环素(PGI2)试剂盒
明尼苏达被毛孢10号染色体开放阅读框88抗体Human Glyoxalase I(GLO1) ELISA Kit人前颗粒蛋白(PGRN)试剂盒
大肠埃希氏杆菌富含半胱氨酸C端蛋白1抗体Human GNβ1(G Protein Beta 1) ELISA Kit人前胶原C内肽酶增强子1(PCOLCE1)试剂盒
海神弧菌E1A激活基因激蛋白2抗体Human GP-73(Golgi Protein 73) ELISA Kit人前胶原C端肽酶(PCP)试剂盒
谷氨酸棒杆菌壁合成蛋白43抗体Human GDN(Glia Derived Nexin) ELISA Kit人前动力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)试剂盒
茯苓19号染色体开放阅读框29抗体Human GH2(Growth Hormone 2) ELISA Kit人前病整合位点1(Pim1)试剂盒
运动发酵单孢菌*磷酸化p21蛋白抗体Human GHAb(Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)试剂盒
短裙竹荪东北变种*磷酸化周期检测点激酶2抗体Human GPⅡb/Ⅲa(Plaet Membrane Glycoprotein Ⅱb/Ⅲa complex) ELISA Kit人葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)试剂盒
金黄壳囊孢磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体Human GHITM(Growth Hormone Inducible Transmembrane Protein) ELISA Kit人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)试剂盒
乳酸杆菌磷酸化周期素依赖性激酶2抗体Human GADL1(Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)试剂盒
长枝木霉磷酸化周期检测点激酶1抗体Human GA(Glycated Albumin) ELISA Kit人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)试剂盒
黑平188磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体Human GABA(Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit人葡萄糖激酶(GCK)试剂盒
人ACTB基因检测试剂盒(荧光PCR法)中心体和纺锤体相关蛋白1抗体2-氧雌二(标准品) Pemetrexed Disodium
9号染色体开放阅读框153抗体2-巯**咪酯(标准品) Phthalylsulfathiazole
4号染色体开放阅读框19抗体2-巯乙烷磺钠(美司那)(标准品) Pioglitazone base
4号染色体开放阅读框27抗体2,3-二(标准品) Pioglitazone base
4号染色体开放阅读框22抗体2‘-脱氧胞苷(标准品) Pioglitazone HCl
4号染色体开放阅读框14抗体3,4,5-三(标准品) Pioglitazone HCl
X染色体开放阅读框21抗体3,4-二氧肉桂(标准品) Pizotifen Malate
磷化C端结合蛋白1抗体3--N-[4(-三氟)苯]异恶唑-4-酰... Polymyxin B Sulfate
钙粘附蛋白8抗体3-黄-8-羧(标准品) Polymyxin B Sulfate
甘氨酸裂解系统H蛋白抗体PAK1/FITC 荧光素标记p21激活激酶1抗体IgG
15号染色体开放阅读框58抗体Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) /FITC 荧光素标记磷酸化p21激活激酶1/2抗体IgG