产品参数:
产品名称: Cry1A(b/c)基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
规格: 48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
货号:BH-P64116
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐��温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
枯草芽孢杆菌6号染色体开放阅读框199抗体Human WNT2(Protein Wnt-2) ELISA Kit人抗EB病抗体(EBV)试剂盒
总状毛霉7号染色体开放阅读框34抗体Human WWC1(Protein KIBRA) ELISA Kit人抗E3泛素蛋白连接酶TRIM21(TRIM21)抗体试剂盒
新疆盐地杆菌6号染色体开放阅读框201抗体Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) ELISA Kit人抗DNA酶B抗体(anti-DNase B Ab)试剂盒
链球菌属6号染色体开放阅读框203抗体Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) ELISA Kit人抗BP180抗体(anti-BP180-Ab)试剂盒
微白螺孢菌6号染色体开放阅读框204抗体Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) ELISA Kit人抗BB抗体(BB-Ab)试剂盒
细链格孢6号染色体开放阅读框206抗体Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) ELISA Kit人军团菌抗体IgM(LP Ab-IgM)试剂盒
黑曲霉6号染色体开放阅读框211抗体Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) ELISA Kit人军团菌抗体IgG(LP Ab-IgG)试剂盒
烟曲霉6号染色体开放阅读框225抗体Human LYPD3(Ly6/PLAUR domain-containing protein 3) ELISA Kit人军团菌抗体IgA(LP Ab-IgA)试剂盒
乳杆菌属6号染色体开放阅读框25抗体Human MAP1LC3A(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3A) ELISA Kit人卷曲螺旋, 肌球蛋白样BCL2 结合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)试剂盒
侧耳6号染色体开放阅读框35抗体Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) ELISA Kit人卷曲蛋白8(FZD8)试剂盒
戴尔根霉6号染色体开放阅读框52抗体Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) ELISA Kit人聚集蛋白(Agrin)试剂盒
第三梭菌6号染色体开放阅读框57抗体Human MAP1LC3B(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3B) ELISA Kit人巨噬移动抑制因子(MIF)试剂盒
棒曲霉6号染色体开放阅读框58抗体Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白5(MIP-5)试剂盒
毛木耳6号染色体开放阅读框62抗体Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)试剂盒
铜绿假单胞菌6号染色体开放阅读框70抗体Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)试剂盒
大肠埃希氏杆菌6号染色体开放阅读框72抗体Human FOLR2(Folate receptor beta) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白2(MIP-2)试剂盒
Cry1A(b/c)基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法)珠蛋白1抗体牡丹皮(标准品) Saikosaponin B2
肌球蛋白轻链9抗体牡丹皮苷C Saikosaponin C
磷化肌球蛋白轻链9抗体牡荆素(标准品) Saikosaponian D
NADH复合体1抗体牡荆素-4''-O-葡萄糖苷 Hederagenin
癌相关抗原抗体牡荆素葡萄糖苷(标准品) Hederagenin
组蛋白乙酰转移酶MOF抗体牡荆素鼠李糖苷(标准品) Epimedin A
间质蛋白抗体木鳖子(标准品) Epimedin A1
肌球蛋白轻链3抗体木芙蓉叶(标准品) Epimedin B
多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体木瓜(标准品) Epmedin C
甘油激酶3抗体p-PKC/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶C抗体IgG
高尔体磷蛋白3样蛋白抗体p-PKC beta 1/2/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶C β1/β2抗体IgG