产品参数:
产品名称: 小麦内源基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
规格: 48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
货号:BH-P64153
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
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耐久肠球菌双特异性磷酸酶22抗体Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) ELISA Kit人补体3裂解产物(C3SP)试剂盒
拟青霉Erdj5/DNAJC10蛋白抗体Human COL7A1(Collagen alpha-1(VII) chain) ELISA Kit人补体1抑制物抗体-IgM(C1INH-IgM)试剂盒
潮湿乳菇肿瘤调亡素/肿瘤坏死因子受体死亡受体6抗体Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) ELISA Kit人补体1抑制物抗体-IgG(C1INH-IgG)试剂盒
樟疫霉跨膜TMIGD1蛋白抗体Human BDG(beta-D-glucan) ELISA Kit人补体1q(C1q)试剂盒
黑曲霉轴丝中链动力蛋白抗体Human TAT (Tyrosine aminotransferase) ELISA KIT人玻连蛋白(VTN)试剂盒
禾谷镰孢*轴丝动力蛋白7抗体Human SKI (Ski oncogene) ELISA KIT人波形蛋白(VIM)试剂盒
大豆慢生根瘤菌环指蛋白19抗体Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) ELISA Kit人并殖吸虫抗体(IgM)试剂盒
枯草芽孢杆菌δ-连环蛋白抗体Human WDTC1 (WD and tetratricopeptide repeats protein 1) ELISA KIT人并殖吸虫抗体(IgG)试剂盒
黄杆菌属防御素β2抗体Human CHIT1(Chitotriosidase-1) ELISA Kit人型肝炎病(HCV)核心抗原(HCV core Ag)试剂盒
青霉磷酸化信号转导功能磷蛋白DAB2抗体Human UXS1 (UDP-glucuronic acid decarboxylase 1) ELISA KIT人型肝炎IgM(HCV-IgM)试剂盒
枯草芽孢杆菌双氧化酶1/甲状腺氧化酶1抗体Human UFL1 (E3 UFM1-protein ligase 1) ELISA KIT人型肝炎IgG(HCV-IgG)试剂盒
绿僵菌双氧化酶2/甲状腺氧化酶2抗体Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) ELISA KIT人酰辅酶A羧化酶β多肽(PCCB)试剂盒
热带假丝酵母双氧化酶成熟因子抗体Human TAT (Tyrosine aminotransferase) ELISA KIT人烯(ACR)试剂盒
爪哇毛霉胞质分裂专一蛋白7抗体Human WRAP73 (WD repeat-containing protein WRAP73) ELISA KIT人酮酸脱氢酶E1(PDH E1)试剂盒
嗜腐烂居****DNA损伤诱导转录样蛋白4抗体Human URGCP (Up-regulator of cell proliferation) ELISA KIT人酮酸激酶R型同工酶(R-PK)试剂盒
小麦内源基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法)紫外切除修复蛋白RAD23B抗体知母皂苷A3(标准品) H-HomoArg-OH
3-羟异丁脱氢酶抗体知母皂苷BII(标准品) L-Hydroxyproline
Hib乙酰辅酶A水解酶抗体知母皂苷E(标准品) L-Hydroxyproline
肿瘤异常化蛋白1抗体栀子(标准品) L-Norleucine
肿瘤异常化蛋白2抗体蜘蛛香(标准品) Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH
缺氧诱导因子脯氨酰羟化酶4抗体植(标准品) 3,5-Diiodo-L-tyrosine
人内源性逆转录病膜糖蛋白2抗体止泻木子(标准品) H-Pyr-OH
Beta氨己糖苷酶beta亚蛋白B链抗体枳壳(标准品) Z-Pyr-OH
HEXIM2蛋白抗体枳实(橙)(标准品) DL-m-Tyrosine
型肝炎病-NS3反转录激活蛋白2抗体Phospho-PSD93 (Tyr340) /FITC 荧光素标记磷酸化突触后密度蛋白93抗体IgG
间隙连接蛋白47抗体PSD-95/FITC 荧光素标记突触后密度蛋白95抗体IgG