产品参数:
产品名称: 菜豆荚斑驳病毒(BPMV)RNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
规格: 48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
货号:BH-P64159
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结���是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
黑曲霉磷酸化DDX58抗体Human SPOPL (Speckle-type POZ protein-like) ELISA KIT人白介素2(IL-2)试剂盒
球孢白僵菌磷酸化DDX58抗体Human SPTA1 (Spectrin alpha chain, erythrocytic 1) ELISA KIT人白介素1受体样1(IL1RL1)试剂盒
酿酒酵母磷酸化结蛋白抗体Human SMTN (Smoothelin) ELISA KIT人白介素1受体相关激酶-4(IRAK-4)试剂盒
微杆菌属磷酸化结蛋白抗体Human SP1(Transcription factor Sp1) ELISA Kit人白介素1受体相关激酶1(IRAK1)试剂盒
产碱假单胞菌二价金属转运蛋白1抗体Human SLC23A1 (Solute carrier family 23 member 1) ELISA KIT人白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)试剂盒
宋内氏志贺氏菌51592多巴受体D2抗体Human SRM (Spermidine synthase) ELISA KIT人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)试剂盒
谢瓦曲霉多巴受体D1抗体Human GPLD1(Phosphatidylinositol-glycan-specific phospholipase D) ELISA Kit人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)试剂盒
*蜜环菌多巴受体相互作用蛋白1抗体Human SMS (Spermine synthase) ELISA KIT人白介素1β转换酶(ICE)试剂盒
紫穗槐根瘤菌凋亡相关蛋白激酶1抗体Human SLC18A3 (Vesicular acetylcholine transporter) ELISA KIT人白介素-1β前体(Pro-IL-1β)试剂盒
白地霉凋亡相关蛋白激酶2抗体Human SON (Protein SON) ELISA KIT人白介素1β前体(pro-IL1B)试剂盒
鲁氏不动杆菌多巴、cAMP调节磷蛋白抗体Human SMPD2 (Sphingomyelin phosphodiesterase 2) ELISA KIT人白介素1β(IL-1β)试剂盒
绳状篮状菌磷酸化多巴/cAMP调节神经磷蛋白抗体Human SLC2A8 (Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 8) ELISA KIT人白介素1α(IL-1α)试剂盒
青霉菌磷酸化多巴/cAMP调节磷蛋白抗体Human SGMS2 (Phosphatidylcholine:ceramide cholinephosphotransferase 2) ELISA KIT人白介素19(IL-19)试剂盒
乳酸乳球菌乳脂亚种磷酸化双皮质素抗体Human SLC2A8 (Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 8) ELISA KIT人白介素18结合蛋白(IL-18BP)试剂盒
球孢链霉菌高加索变种磷酸化Disabled 1抗体Human SORT1(Sortilin) ELISA Kit人白介素18(IL-18)试剂盒
产氨短杆菌磷酸化Disabled 1抗体Human SGMS2 (Phosphatidylcholine:ceramide cholinephosphotransferase 2) ELISA KIT人白介素17F(IL-17F)试剂盒
菜豆荚斑驳病毒(BPMV)RNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法)自噬相关蛋白1抗体红细胞**素受体(EPOR)检测试剂盒EPOR ELISA Kit
β淀粉样肽1-16/Aβ1-16 抗体红细胞**素(EPO)检测试剂盒EPO ELISA Kit
腺瘤肉调节蛋白抗体横纹肌辅肌动蛋白α(sm Actinin-α)检测试剂盒sm Actinin-α ELISA Kit
衔接因子蛋白含pH域蛋白1抗体黑色素细胞抗体(MC Ab)检测试剂盒MC Ab ELISA Kit
水通道蛋白-7抗体黑色素瘤(Melanoma)检测试剂盒Melanoma ELISA Kit
谷氨氨转移酶1抗体核转录因子kBP65(NFkBP65)检测试剂盒NFkBP65 ELISA Kit
p21活化蛋白激酶ARHG7抗体核转录因子1(AP-1)检测试剂盒AP-1 ELISA Kit
磷化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体核因子-κB亚p65亲和肽(NF-κB p65)检测试剂盒NF-κB p65 ELISA Kit
2-氨乙硫双加氧酶抗体核因子κB亚p65亲和肽(NF-κB p65)检测试剂盒NF-κB p65 ELISA Kit
糖原合酶激酶-3β抗体PTHrP/FITC 荧光素标记状旁腺**相关蛋白抗体IgG
三磷酸鸟苷环水解酶抗体Survivin/RBITC 红色荧光素罗丹明标记 Survivin 蛋白抗体(标记抗体)