使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品参数:
产品名称: 南芥菜花叶病毒(ArMV)RNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
规格: 48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
货号:BH-P64162
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
Deinococcus癌中心体相关蛋白抗体Human VIMP (Selenoprotein S) ELISA KIT人γ氨基丁酸(GABA)试剂盒
藤黄孢链霉菌DCAF13蛋白抗体Human RUNDC1 (RUN domain-containing protein 1) ELISA KIT人β-转导素重复序列包含蛋白(BTRC)试剂盒
异硫霉素链霉菌原钙粘蛋白16抗体Human S100PBP (S100P-binding protein) ELISA KIT人β抑制蛋白2(ARRB2)试剂盒
哈氏木霉雌受体相关蛋白α抗体Human MSRB1 (Methionine-R-sulfoxide reductase B1) ELISA KIT人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)试剂盒
新月弯孢DPY19L2蛋白抗体Human SAC3D1 (SAC3 domain-containing protein 1) ELISA KIT人β素(BTC)试剂盒
新城疫病二氢嘧啶脱氢酶抗体Human SAV1 (Protein salvador homolog 1) ELISA KIT人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)试剂盒
马克斯克鲁维酵母保加利亚变种短粗矮胖19蛋白样1抗体Human BRCA2(Breast cancer type 2 susceptibility protein) ELISA Kit人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)试剂盒
异常威克汉姆酵母DPY19L4蛋白抗体Human SDS (L-serine dehydratase/L-threonine deaminase) ELISA KIT人β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)试剂盒
地衣芽孢杆菌二肽基肽酶9抗体Human STYX (Serine/threonine/tyrosine-interacting protein) ELISA KIT人β乳糖蛋白抗体IgG 试剂盒
栗疫病菌二肽基肽酶8抗体Human NIM1K (Serine/threonine-protein kinase NIM1) ELISA KIT人β羟丁酸(β-OHB)试剂盒
黄赭色链霉菌多巴受体D4抗体Human SSR3 (Translocon-associated protein subunit gamma) ELISA KIT人β葡萄糖酸苷酶(βGD)试剂盒
草假单胞菌DQX1蛋白抗体Human SIGIRR (Single Ig IL-1-related receptor) ELISA KIT人β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)试剂盒
啤酒酵母三磷酸腺苷依赖解旋酶ddx5抗体Human PGAM5 (Serine/threonine-protein phosphatase PGAM5, mitochondrial) ELISA KIT人β萘酚(β-naphthol)试剂盒
植物乳杆菌磷酸化三磷酸腺苷依赖解旋酶ddx5抗体Human SSBP2 (Single-stranded DNA-binding protein 2) ELISA KIT人β内啡肽受体(β-EPR)试剂盒
杏鲍菇阅读障碍相关蛋白DLX2抗体Human NEMF (Nuclear export mediator factor NEMF) ELISA KIT人β内啡肽(β-EP)试剂盒
酿酒酵母肌营养蛋白α抗体Human RRM2B(Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2 B) ELISA Kit人β-连环蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)试剂盒
南芥菜花叶病毒(ArMV)RNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法)棕榈酯Human
棕榈异酯Human, Mouse, Rat
(-)-3-萜Human
(-)-薄荷Human, Mouse
(-)-紫苏Human
(+)-α-[1-(二氨)乙]苯Human
(+)-薄荷Human
(+)-小茴香Human, Mouse
(+)-紫苏Human
磷酸化G蛋白通路抑制蛋白1抗体Rabbit human sIgA/FITC 荧光素标记兔抗人分泌型IgA抗体
脑糖原磷酸化酶抗体Rabbit -mouse IgA/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗小鼠IgA抗体
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。