产品参数:
产品名称: 羊源性成分检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
规格: 48T 0.2PCR管
货号:BH-P64185
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
![](https://yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202108/202108051515218291.png)
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
大肠埃希菌乙基二酸脑病蛋白抗体Human IARS (Isoleucine–tRNA ligase, cytoplasmic) ELISA KIT人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)试剂盒
卵孢木霉转录因子E2F-3抗体Human ISPD (Isoprenoid synthase domain-containing protein) ELISA KIT人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)试剂盒
球毛壳转录因子E2F-5抗体Human IL17C(Interleukin-17C) ELISA Kit人2 型次核苷酸脱氢酶(IMPDH)(IMPDH2)试剂盒
耐寒短杆菌DNA切除修复蛋白1抗体Human ICMT (Protein-S-isoprenylcysteine O-methyltransferase) ELISA KIT人Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒
盐屋链霉菌转录因子E2F6抗体Human IL21R(Interleukin-21 receptor) ELISA Kit人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)试剂盒
黑曲霉胶质谷氨酸运载蛋白2抗体Human JDP2 (Jun dimerization protein 2) ELISA KIT人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)试剂盒
灰鹅膏菌胶质谷氨酸运载蛋白3抗体(神经/上皮谷氨酸运载蛋白)Human ITSN1 (Intersectin-1) ELISA KIT人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(CTX-I)试剂盒
韩国游动微菌内皮素转化酶2抗体Human JSRP1 (Junctional sarcoplasmic reticulum protein 1) ELISA KIT人Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)试剂盒
烟曲霉椭孢变种嗜酸性粒阳离子蛋白抗体Human ITSN2 (Intersectin-2) ELISA KIT人Ⅰ型胶原C端肽(ICTP)试剂盒
糙孢篮状菌类表皮生长因子域7抗体Human IPP (Actin-binding protein IPP) ELISA KIT人Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)试剂盒
嗜中温寒冷杆菌α弹性蛋白抗体Human KLKB1 (Plasma kallikrein) ELISA KIT人1型1-磷酸鞘氨受体(S1P1)试剂盒
硬毛栓孔菌黄热病包膜糖蛋白抗体Human IQUB (IQ and ubiquitin-like domain-containing protein) ELISA KIT人17-酮类固(17-KS)试剂盒
酿酒酵母HER2受体抗体Human INIP (SOSS complex subunit C) ELISA KIT人17-羟孕烯酮试剂盒
产气列契瓦尼尔氏菌转录因子E2F-4抗体Human ICA1(Islet cell autoantigen 1) ELISA Kit人17羟孕酮(17-OHP)试剂盒
葡萄座腔菌磷酸化表皮生长因子受体抗体Human INIP (SOSS complex subunit C) ELISA KIT人17羟皮质类固(17-OHCS)试剂盒
砖色栖砂杆菌磷酸化表皮生长因子受体抗体Human TTPA(Alpha-tocopherol transfer protein) ELISA Kit人17-α-羟化酶(17-α-OH)试剂盒
羊源性成分检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
γ谷氨酰转肽酶2轻链抗体RUNX1/AML1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠急性髓白血病1蛋白抗体IgG
γ-谷氨酰转肽酶5轻链抗体RUNX1/AML1(phospho Ser249) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化急性髓白血病1蛋白抗体IgG