产品参数:
产品名称: 马源性成分检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
规格: 48T 0.2PCR管
货号:BH-P64193
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
![](https://yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202108/202108051515218291.png)
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
汉逊德巴利酵母泛素激活酶E1抗体Human TREM2(Triggering receptor expressed on myeloid cells 2) ELISA Kit犬类胰蛋白酶试剂盒
梅花状青霉表皮生长因子受体抗体Human FNBP1 (Formin-binding protein 1) ELISA KIT犬类风湿因子(RF)试剂盒
黄硬皮马勃Ets转录因子家族ets1抗体Human FKRP (Fukutin-related protein) ELISA KIT犬抗**/血管加压素/精氨酸加压素(AVP)试剂盒
阿维菌素链霉菌早期B因子1抗体Human FUOM (Fucose mutarotase) ELISA KIT犬抗狂犬病(RV)抗体试剂盒
枯草芽孢杆菌内皮素受体A抗体Human FNBP1L (Formin-binding protein 1-like) ELISA KIT犬巨噬来源的趋化因子(MDC/CCL22)试剂盒
绛红产色小单胞菌表皮生长因子受体抗体Human GPRC6A (G-protein coupled receptor family C group 6 member A) ELISA KIT犬结缔组织生长因子(CTGF)试剂盒
红冬孢酵母属表皮生长因子受体抗体Human GPBAR1 (G-protein coupled bile acid receptor 1) ELISA KIT犬结蛋白(Des)试剂盒
白灵侧耳早期生长应答蛋白1抗体Human FOSL1 (Fos-related antigen 1) ELISA KIT犬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)试剂盒
Hyalodendriella betulae Crous 表皮膜蛋白1抗体Human FFAR1 (Free fatty acid receptor 1) ELISA KIT犬降钙素原(PCT)试剂盒
贪噬菌内皮受体蛋白酪氨酸激酶A抗体(肿瘤坏死因子α诱导蛋白4)Human FRAS1 (Extracellular matrix protein FRAS1) ELISA KIT犬降钙素(CALCA)试剂盒
香菇酪氨酸蛋白激酶A4抗体Human FRAT1 (Proto-oncogene FRAT1) ELISA KIT犬碱性磷酸酶(ALP)试剂盒
不吸水链霉菌前列腺素E受体3抗体Human TREM2(Triggering receptor expressed on myeloid cells 2) ELISA Kit犬甲状腺素(T4)试剂盒
孟氏假单胞菌雌受体α抗体Human FRAT2 (GSK-3-binding protein FRAT2) ELISA KIT犬甲状旁腺(PTH)试剂盒
枯草芽孢杆菌ENPP3抗体IgGHuman FUOM (Fucose mutarotase) ELISA KIT犬基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)试剂盒
相思根瘤菌丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体Human FNBP1 (Formin-binding protein 1) ELISA KIT犬基质金属蛋白酶3(MMP-3)试剂盒
植物乳杆菌胚胎干RAS蛋白抗体Human GPRC6A (G-protein coupled receptor family C group 6 member A) ELISA KIT犬基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒
马源性成分检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
乙酰肝素酶2抗体SATB1/FITC 荧光素标记核质结合区结合蛋白1抗体IgG
人血清抗体Phospho-SATB1 (Ser47)/FITC 荧光素标记磷酸化核质结合区结合蛋白1抗体IgG