产品参数:
产品名称: 鱼源性成分检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
规格: 48T 0.2PCR管
货号:BH-P64196
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
![](https://yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202108/202108051515218291.png)
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
枯草芽孢杆菌枯草亚种磷酸化表皮生长因子受体抗体Human PGR(Progesterone receptor) ELISA Kit犬促肾上腺皮质(ACTH)试剂盒
木耳Au888磷酸化表皮生长因子受体抗体Human FSCB (Fibrous sheath CABYR-binding protein) ELISA KIT犬促肾上皮质释放(CRH)试剂盒
彩色豆马勃磷酸化表皮生长因子受体抗体Human FSIP1 (Fibrous sheath-interacting protein 1) ELISA KIT犬促卵泡素(FSH)试剂盒
暗拟茎点霉*磷酸化表皮生长因子受体抗体Human ARSD(Arylsulfatase D) ELISA Kit犬促甲状腺素(TSH)试剂盒
黑曲霉磷酸化表皮生长因子受体抗体Human EVX1 (Homeobox even-skipped homolog protein 1) ELISA KIT犬雌(E)试剂盒
围小丛壳菌磷酸化表皮生长因子受体抗体Human FCGR2C (Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-c) ELISA KIT犬雌二(E2)试剂盒
球孢白僵菌磷酸化表皮生长因子受体抗体Human EVX2 (Homeobox even-skipped homolog protein 2) ELISA KIT犬成纤维生长因子23(FGF23)试剂盒
枯草芽孢杆菌磷酸化表皮生长因子受体抗体Human FCHSD2 (F-BAR and double SH3 domains protein 2) ELISA KIT犬不对称二甲基精氨酸(ADMA)试剂盒
青霉属磷酸化表皮生长因子受体抗体Human SLC30A3(Zinc transporter 3) ELISA Kit犬表面活性蛋白D(SP-D)试剂盒
耐碱马赛菌磷酸化表皮生长因子受体抗体Human EWSR1 (RNA-binding protein EWS) ELISA KIT犬表达于SiSo系的受体结合型肿瘤抗原(EBAG9)试剂盒
炭黑曲霉磷酸化表皮生长因子受体抗体Human FCHO1 (F-BAR domain only protein 1) ELISA KIT犬半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)试剂盒
黑附球菌磷酸化表皮生长因子受体抗体Human EXO5 (Exonuclease V) ELISA KIT犬白介素8(IL-8/CXCL8)试剂盒
八孢裂殖酵母磷酸化表皮生长因子受体抗体Human EXTL1 (Exostosin-like 1) ELISA KIT犬白介素7受体(IL7R)试剂盒
弗雷德里克斯堡假单胞菌磷酸化转录接头蛋白EP300抗体Human FCHO2 (F-BAR domain only protein 2) ELISA KIT犬白介素6(IL-6)试剂盒
小奥德蘑磷酸化转录因子ELK1抗体Human FCGR2C (Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-c) ELISA KIT犬白介素4(IL-4)试剂盒
三骨菇磷酸化转录因子ELK1抗体Human EVX2 (Homeobox even-skipped homolog protein 2) ELISA KIT犬白介素2(IL-2)试剂盒
鱼源性成分检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
组蛋白H1抗体SCN9A/NAV1.7/FITC 荧光素标记电压开启的钠离子通道SCN9AIgG
组蛋白去乙酰化酶1抗体SCP2/NLTP/FITC 荧光素标记固携带蛋白2抗体IgG