产品参数:
产品名称: A型流感病毒通用型检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64247
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
拟香味类香味菌磷酸化GATA结合蛋白3抗体Human UNC45A ELISA Kit大鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)试剂盒
沙氏芽孢杆菌延伸因子G2抗体Human UQCR ELISA Kit大鼠游离脂肪酸(FFA)试剂盒
姬松茸*葡糖淀粉酶抗体Human UNC45B ELISA Kit大鼠游离原卟啉(FEP)试剂盒
酿酒酵母谷氨酰6-磷酸果糖转移酶抗体Human UNC5A ELISA Kit大鼠游离状腺原氨酸(Free-T3)试剂盒
热带假丝酵母谷胱甘肽S转移酶θ抗体Human UNC5CL ELISA Kit大鼠游离肉碱试剂盒
樟疫霉谷胱甘肽S转移酶θ2抗体Human UNC5D ELISA Kit大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)试剂盒
柠檬色葡萄球菌γ-谷氨酰转肽酶6抗体Human UNG ELISA Kit大鼠游离甲状腺素(FT4)试剂盒
闪光须霉颗粒酶A抗体Human UNKL ELISA Kit大鼠游离睾酮(F-TESTO)试剂盒
金灰青霉颗粒酶D/B/E/N/G/F/H抗体Human UQCR ELISA Kit大鼠游离雌三(FE3)试剂盒
红曲红曲粒-巨噬集落激因子3受体抗体Human UNC45A ELISA Kit大鼠游离β绒毛膜促性腺(f-βCG)试剂盒
分枝卷霉血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体Human UNC45B ELISA Kit大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)试剂盒
溶藻弧菌G蛋白修补结构域蛋白3抗体Human UNC5A ELISA Kit大鼠硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)试剂盒
豇豆慢生根瘤菌G蛋白偶联受体GPR63蛋白抗体Human UGT8 ELISA Kit大鼠吲哚2,3-双加氧酶(IDO)试剂盒
猪链球菌磷酸化珠蛋白转录因子1抗体Human UHMK1 ELISA Kit大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)试剂盒
成团泛菌G蛋白偶联受体109A抗体Human POMT1(Protein O-mannosyl-transferase 1) ELISA Kit大鼠抑制素B(INH-B)试剂盒
孟氏假单胞菌G蛋白偶联受体15抗体Human UHRF1BP1L ELISA Kit大鼠抑制素A(INH-A)试剂盒
A型流感病毒通用型检测试剂盒(荧光-PCR法)糖代谢相关蛋白1抗体山麦冬皂苷B 1,10-Phenanthroline-5,6-dione
G蛋白偶联受体64抗体山麦冬皂苷B(标准品) TPP (=Tetraphenylporphyrin)
γ氨丁受体相关蛋白样1抗体山麦冬皂苷J TCPP [=Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin]
法尼二磷合酶1抗体酚(标准品) Azomethine H
鸟嘌呤核苷结合蛋白1抗体酚-3-O-β-D-槐糖苷;酚-3-O-槐糖苷 N-Methylfurohydroxamic Acid
胶质纤维性蛋白GFAPδ抗体酚-4’-O-葡萄糖苷;酚-4’-O-β-D-... 2,2'-Bicinchoninic Acid Dipotassium Salt Hydrate
β半乳糖苷酶抗体酚-7-O-葡萄糖苷 Chloranilic Acid
巨轴索蛋白GAN抗体苷(标准品) Pyrogallol Red
G蛋白偶联受体结合蛋白O亚A2抗体素(标准品) Zincon