产品参数:
产品名称: 牛支原体(MYPB)检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64306
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大��加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
酿酒酵母人类白抗原G抗体(N端)Human SLCO4C1 ELISA Kit大鼠TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)试剂盒
Luteolibacter人类白抗原G抗体(C端)Human SLFNL1 ELISA Kit大鼠Tau蛋白试剂盒
埃希氏菌属缺氧诱导基因95抗体Human SLC43A1 ELISA Kit大鼠TAR DNA结合蛋白43(TARDBP)试剂盒
白乳菇泛素蛋白连接酶E2抗体Human SLCO6A1 ELISA Kit大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)试剂盒
高地芽胞杆菌同源盒蛋白HOXC9抗体Human SLC27A3 ELISA Kit大鼠Smad7 试剂盒
晦涩小粘束霉环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型2/4抗体Human SLC30A6 ELISA Kit大鼠Smad1 试剂盒
果生链核盘菌转录因子HELT蛋白抗体Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) ELISA Kit大鼠SHC转化蛋白1(SHC1)试剂盒
云南球盖菇转录因子HES6抗体Human SLC35F2 ELISA Kit大鼠S100B蛋白(S-100B)试剂盒
骚动厄氏菌同源盒蛋白H6亚型2抗体Human SLC35A1 ELISA Kit大鼠S100-A5蛋白(S100A5)试剂盒
Sphingomonas phyllosphaerae硫酸乙酰肝素6脑苷脂转硫酸酶1抗体Human SLC34A2 ELISA Kit大鼠Rho相关GTP结合蛋白RhoE 试剂盒
球孢白僵菌神经保护肽HN抗体Human SLC36A4 ELISA Kit大鼠Rho鸟苷酸交换因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)试剂盒
美澳型核果褐腐病菌大鼠细小病H-1株(H-1)抗体(N端)Human SLC30A6 ELISA Kit大鼠Ras相关蛋白Rab-11A 试剂盒
丽齿菌属透明质酸合成酶1抗体Human SLC25A18 ELISA Kit大鼠Ras相关C3肉素底物1(RAC1)试剂盒
美澳型核果褐腐病菌缺氧诱导因子3α/HIF-3α抗体Human SLC34A2 ELISA Kit大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)试剂盒
黑曲霉缺氧诱导因子脯氨酰4羟化酶抗体Human SLC25A15 ELISA Kit大鼠P物质受体(SP-R)试剂盒
溶血性曼氏杆菌透明质酸酶2/玻璃酸酶2抗体Human SLC25A22 ELISA Kit大鼠P物质(SP)试剂盒
牛支原体(MYPB)检测试剂盒(荧光-PCR法)外周蛋白2抗体2,4-二氨-6-苯-7-蝶啶 4-Nitropyrene
区带蛋白PZP抗体2-(R)-[1-(R)-(3,5-二(三氟)苯... 2-Aminofluorene
蛋白香叶烯转移酶1β(FTβ)抗体2-[(2,6-二)氨]苯 2-Amino-9-fluorenone
原钙粘蛋白15抗体2-(巯)腺苷 5'-三磷四钠盐水合物 2-Amino-9,9-dimethylfluorene
原钙粘蛋白β2抗体2-氨-5,6-二-3(4H)-喹唑啉醋(阿那格... 9-Bromofluorene
原钙粘蛋白β4抗体2-氨-6,8-二羟嘌呤盐盐 2-Bromofluorene
原钙粘蛋白γ10抗体2-氨-6-羟-8-巯嘌呤 2-Bromo-9-fluorenone
原钙粘蛋白γA4抗体2-氨-6-巯嘌呤-9-D-核苷水合物 2-Bromo-9,9-dimethylfluorene
原钙粘蛋白γA2抗体2-氨腺苷 2,7-Diaminofluorene