产品参数:
产品名称: 马链球菌兽疫亚种( SEZ)检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64319
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
孤岛盐单胞菌二甲基化组蛋白H3K4抗体Human SCN4B ELISA Kit类人猿ELISA试剂盒
海南小短杆菌二甲基化组蛋白H3K9抗体Human SDCCAG10 ELISA Kit类人猿球蛋白G4(IgG4)试剂盒
梾木生壳针孢基化组蛋白H3抗体Human SEC23IP ELISA Kit类人猿巨噬集落激因子(M-CSF)试剂盒
植物乳杆菌植物亚种乙酰化组蛋白H3抗体Human VTCN1(V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1) ELISA Kit类人猿降钙素基因相关肽(CGRP)试剂盒
枯草芽孢杆菌乙酰化组蛋白H3抗体Human SEC24C ELISA Kit类人猿降钙素(CT)试剂盒
烬灰红链霉菌果糖发酵亚种磷酸化肝核因子4α抗体Human SEC24A ELISA Kit类人猿黄体**素(LH)试剂盒
赖氨酸芽胞杆菌属高迁移率核小体结合蛋白1Human SEC31A ELISA Kit类人猿骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)试剂盒
根瘤菌磷酸化组蛋白H3抗体Human SDR39U1 ELISA Kit蝌蚪ELISA试剂盒
木蹄层孔菌组织相容性复合体α抗体Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit蝌蚪睾酮(T)试剂盒
黑木耳肝生长因子激活抑制蛋白2抗体Human SEC61alpha ELISA Kit蝌蚪雌二(E2)试剂盒
植物乳杆菌HOMER2抗体Human SDR42E1 ELISA Kit蝌蚪γ氨基丁酸(GABA)试剂盒
虫类神食酵母瘤病调控因子1抗体(锌指蛋白395)Human SDCCAG8 ELISA Kit鲸ELISA试剂盒
桔橙小单孢菌人类状瘤病18 E6单克隆抗体Human SCN4B ELISA Kit鲸孕/孕酮(PROG)试剂盒
白鹅膏菌(不可订购)异质核糖核蛋白F抗体Human SDCCAG10 ELISA Kit鲸状腺原氨酸(T3)试剂盒
沃氏富盐菌异质核糖核蛋白K抗体Human SCNM1 ELISA Kit鲸皮质(Cortisol)试剂盒
相思根瘤菌异质核糖核蛋白L抗体Human SCNN1A ELISA Kit鲸甲状腺素(T4)试剂盒
马链球菌兽疫亚种( SEZ)检测试剂盒(荧光-PCR法)微小染色体维持缺陷蛋白7抗体甜茶苷;甜叶悬钩子苷(标准品) Schizandrin A
单核趋化蛋白2抗体(小鼠)甜橙黄(标准品) Schizandrin B
单核趋化蛋白3抗体甜瓜蒂(标准品) Schisantherin A
单核趋化蛋白3抗体甜菊苷(标准品) Sipeimine
巨噬炎症蛋白18抗体甜叶菊(标准品) Crocin
MITF相关转录因子抗体铁冬青;毛冬青(标准品) Crocin I
雷帕霉素靶蛋白抗体铁筷子(标准品) Crocin II
粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗体铁皮石斛(标准品) Tenuifolin
粘蛋白4抗体铁扫帚(标准品) Agrimol B