产品参数:
产品名称: 西尼罗河病毒(WNV)检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64326
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增���靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
芽胞杆菌干扰素α抗体Human RSPH3 ELISA Kit鱼热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒
格氏糖多孢菌磷酸化肌聚磷酸盐磷酸酶样蛋白1抗体Human RSPH9 ELISA Kit鱼热休克蛋白40(HSP-40)试剂盒
白僵菌磷酸化肌聚磷酸盐磷酸酶样蛋白1抗体Human RRN3 ELISA Kit鱼去甲肾上腺素(NE)试剂盒
枯草芽孢杆菌抑制素βC抗体Human RPS6KL1 ELISA Kit鱼前列腺素E2(PGE2)试剂盒
酿酒酵母白介素16抗体Human RXRB(Retinoic acid receptor RXR-beta) ELISA Kit鱼葡萄糖激酶(GCK)试剂盒
酿酒酵母抑制素βB/Inhibin β B抗体Human NR1I2(Nuclear receptor subfamily 1 group I member 2) ELISA Kit鱼葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)试剂盒
塔宾曲霉白介素11抗体Human RPS4Y1 ELISA Kit鱼皮质(Cortisol)试剂盒
微黄大洋芽孢杆菌白介素22受体抗体Human RPS9 ELISA Kit鱼内皮素1(ET-1)试剂盒
戈登氏菌属白介素26抗体Human RPS8 ELISA Kit鱼球蛋白M(IgM)试剂盒
灰树花2号白介素-17D抗体Human RPS7 ELISA Kit鱼球蛋白A(IgA)试剂盒
马赛菌环指蛋白217抗体Human RRAGB ELISA Kit鱼卵泡(FSH)试剂盒
花楸盘多毛孢白介素2抗体(人)Human RQCD1 ELISA Kit鱼卵黄高磷蛋白(PV)试剂盒
Pseudomonas koreensis Kwon et al. 白介素-23受体抗体Human RRAS2 ELISA Kit鱼磷酸烯酮酸羧激酶,线粒体(PCK2)试剂盒
蜡样芽孢杆菌胰岛素样生长因子结合蛋白3抗体Human RRN3 ELISA Kit鱼磷酸烯酮酸羧激酶,质基质[GTP](PCK1)试剂盒
巴斯德驹形氏酵母白介素6受体β抗体IL-6RβHuman RRAS ELISA Kit鱼磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(pACCase)试剂盒
巴西果小克银汉霉干扰素-gamma受体1抗体Human RPS27 ELISA Kit鱼磷酸果糖激酶(PFK)试剂盒
西尼罗河病毒(WNV)检测试剂盒(荧光-PCR法)胃泌素(抗原)拉米夫定(标准品)Human, Mouse
α-酰辅酶A消旋酶抗原拉米夫定(标准品)Human
胶质纤维性蛋白(抗原)拉莫三 (标准品)Human, Mouse, Rat
腺苷单磷活化蛋白激酶β1抗原拉西地平(标准品)Human, Mouse
质金属蛋白酶-1来氟米特(标准品)Human, Mouse, Rat
质金属蛋白酶-2(多肽抗原)来氟米特杂质I(4-三氟)(标准品)Human
质金属蛋白酶-3(抗原)来氟米特杂质Ⅱ(标准品)Human, Mouse, Rat
质金属蛋白酶-7(抗原)赖氨匹林(标准品)Human, Mouse, Rat
金属质蛋白酶-14赖脯胰岛素(标准品)Human, Mouse