产品参数:
产品名称: 牡蛎疱疹病毒(OsHV)检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64353
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
香菇氨基末端激酶1/2抗体Human PSAT1 ELISA Kit胰岛素样因子3(INSL3)ELISA试剂盒
假单胞菌氨基末端激酶1/2/3抗体Human PSD2 ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7/MAC25/PSF)ELISA试剂盒
约氏乳杆菌氨基末端激酶1/3抗体Human PSKH2 ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)ELISA试剂盒
产单核李氏杆菌连接蛋白JPH4抗体Human PSMA/GCPII ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒
平菇组蛋白去甲基转移酶JMJD7抗体Human BECN1(Beclin-1) ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒
灰葡萄孢磷酸化原癌基因c-Jun抗体Human PSMA1 ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒
拉曼伞状霉磷酸化活化蛋白激酶D抗体Human PSMA6 ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌磷酸化活化蛋白激酶B抗体Human PSMA4 ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋3(IGFBP-3)ELISA试剂盒
中国葡萄座腔菌磷酸化活化蛋白激酶B抗体Human PSMA3 ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋2(IGFBP-2)ELISA试剂盒
茶拟茎点霉磷酸化组蛋白去甲基化酶JMJD2B抗体Human PSMA2 ELISA Kit胰岛素样生长因子结合蛋1(IGFBP-1)ELISA试剂盒
隐红碱线菌丝裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗体Human PSMA7 ELISA Kit胰岛素样生长因子2受体(IGF-2R)ELISA试剂盒
硫磺菌丝裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白3抗体Human PSMB1 ELISA Kit胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒
北方蜜环菌磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗体Human PSMA8 ELISA Kit胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)ELISA试剂盒
地衣芽孢杆菌磷酸化蛋白质酪氨酸激酶JAK-1抗体Human MYL9(Myosin regulatory light polypeptide 9) ELISA Kit胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒
西蕃莲茎基腐病氨基末端激酶2抗体PSMB10(Proteasome subunit beta type-10) ELISA Kit胰岛素受体底物2(IRS-2)ELISA试剂盒
大肠埃希菌连接介导调节蛋白抗体Human PSMB11 ELISA Kit胰岛素受体底物1(IRS1)ELISA试剂盒
牡蛎疱疹病毒(OsHV)检测试剂盒(荧光-PCR法)线粒体复合物NDUFS4蛋白抗体异荭草苷(标准品) Minoxidil
NADH脱氢酶α家族8抗体异槲皮苷(标准品) 7-Hydroxy-4-methylcoumarin
NADH脱氢酶黄素蛋白1抗体异黄腐 7-Hydroxy-4-methylcoumarin
NADH脱氢酶黄素蛋白2抗体异黄芪皂苷I(标准品) Testosterone undecanoate
NADH氧化还原酶辅酶1抗体异黄芪皂苷II(标准品) Dipyridamole
膜内在蛋白NOD26抗体异黄芪皂苷IV(标准品) S-Carboxymethyl-L-cysteine
磷化谷氨受体2B抗体异茴芹内酯(标准品) Isosorbide dinitrate
磷化谷氨受体2A+2B抗体异苦参 Laurocapram
高度相似的周期蛋白激酶NEK6抗体异类叶升麻苷;异毛蕊花糖苷(标准品) Oxymetazoline hydrochloride