PCR反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
产品参数：
产品名称： 鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)检测方法(荧光-PCR法)
规格： 50T
货号：BH-P64359
公司产品仅用于科研分类：荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用及效果：
标准的PCR反应体系：
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
松鼠葡萄球菌磷酸化抑癌蛋白EZH2抗体Human PPP1R9A ELISA Kit血浆抗凝蛋白S(PS)ELISA试剂盒
Pseudomonas batumici 组蛋白去甲基化酶JARID1B抗体Human PPP1CC ELISA Kit血浆抗凝蛋白C(PC)ELISA试剂盒
少孢哈萨克斯坦酵母硫酸角质素抗体Human PPP3R2 ELISA Kit血浆激肽释放酶(KLKB1)ELISA试剂盒
玫烟色棒束孢角质生长因子调节蛋白2抗体Human PPP2CA ELISA Kit血浆胆固酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒
Bacillus sp.离子通道蛋白G蛋白4抗体Human PPP2R1B ELISA Kit血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒
海假交替单胞菌通道多聚体结构域KCTD18抗体Human PPP2CB ELISA Kit血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒
多主葡萄壳菌胞质接头蛋白Keap1Human PPP1CC ELISA Kit血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒
芽胞杆菌舞蹈症相关蛋白KALRN抗体Human PPP1R10 ELISA Kit血红素加氧酶2(HO-2)ELISA试剂盒
多粘类芽孢杆菌内流通道蛋白Kir4.1抗体Human PPP2R2A ELISA Kit血红素加氧酶1(HO-1)ELISA试剂盒
金黄色葡萄球菌金黄亚种样蛋白3抗体Human PPP2R2B ELISA Kit血红素加氧酶(HO)ELISA试剂盒
酿酒酵母KLF样转录因子7抗体Human PPP1R7 ELISA Kit血红蛋白晚期糖基化终末产物(Hb-AGE)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌Kelch样蛋白8抗体Human PPP3CB ELISA Kit血红蛋白β亚基(HB-β)ELISA试剂盒
鸡新城疫病血凝抑制试验（HI）阳性血清离子通道蛋白家族KCNQ2抗体Human PPP1R8 ELISA Kit血红蛋白α亚基(HB-α)ELISA试剂盒
黑曲霉离子通道多聚体结构域蛋白7抗体Human PPP3CC ELISA Kit血红蛋白H(HbH)ELISA试剂盒
黄杆菌通道蛋白1抗体Human PPP1R9A ELISA Kit血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒
大斑凸脐蠕孢电压门控通道蛋白1抗体Human PPP3R2 ELISA Kit血红蛋白(Hb)ELISA试剂盒
鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)检测方法(荧光-PCR法)腺苷环化酶9抗体雌三醇(E3)检测试剂盒E3 ELISA Kit
肌侧索硬化症相关蛋白2（2号染色体）抗体雌**硫转移酶(SULT1E1)检测试剂盒SULT1E1 ELISA Kit
三磷腺柠檬裂解酶抗体雌**(E)检测试剂盒E ELISA Kit
β淀粉样蛋白前体结合蛋白B-1抗体雌二醇受体(ER)检测试剂盒ER ELISA Kit
内收蛋白a1抗体雌二醇(E2)检测试剂盒E2 ELISA Kit
α2纤溶酶色素上皮衍生因子抗体垂体腺苷环化酶激活肽(PACAP)检测试剂盒PACAP ELISA Kit
膜粘连蛋白7抗体垂草扁桃(VMA)检测试剂盒VMA ELISA Kit
早老素γ分泌酶抗体穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)检测试剂盒PF/PFP ELISA Kit
钠ATP酶蛋白a1抗体程序性死亡1(PD-1)检测试剂盒PD-1 ELISA Kit