产品参数:
产品名称: 草鱼出血热病毒(GCHV)检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64367
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
![](https://yt.yzimgs.com/ComFolder/200132334/image/202108/202108051515218291.png)
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
猪丹丝菌Ki67蛋白抗体Human PLCD3 ELISA Kit衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒
酿酒酵母离子通道蛋白EAG1抗体Human PLCD4 ELISA Kit酰基化饥饿素(AG)ELISA试剂盒
苏云金芽胞杆菌转染抑癌基因KLF6抗体Human Plexin B2 ELISA Kit酰化激蛋白(ASP)ELISA试剂盒
盘长孢状盘孢KLF样转录因子8抗体Human PLCH1 ELISA Kit纤维母生长因子受体1癌基因伴侣(FGFR1OP)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌胞质接头蛋白Keap1抗体Human PLCL2 ELISA Kit纤维母表面抗原(FSP)ELISA试剂盒
异常汉逊酵母磷酸化肠道内富含的Kruppel样因子5抗体Human PLCD4 ELISA Kit纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌磷酸化抑癌蛋白EZH2抗体Human Plexin B2 ELISA Kit纤维连接蛋白(FN)ELISA试剂盒
大肠埃希菌AEG-1抗体Human PLCH1 ELISA Kit纤维介素蛋白(fgl2)ELISA试剂盒
桔青霉白介素6抗体Human PLCL2 ELISA Kit纤维胶凝蛋白3(FCN3)ELISA试剂盒
小单孢菌低密度脂蛋白抗体Human PLCH1 ELISA Kit纤维蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒
金黄色葡萄球菌LRRC19蛋白抗体Human PLCL2 ELISA Kit纤维蛋白原α链(FGA)ELISA试剂盒
麦根腐平脐蠕孢层粘连蛋白受体1单克隆抗体Human PLA2G4F ELISA Kit纤维蛋白原(Fb)ELISA试剂盒
粉红镰刀菌层粘连蛋白受体1单克隆抗体Human PLA2G4E ELISA Kit纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒
盔形毕赤酵母T活化连接蛋白抗体Human PON3(Serum paraoxonase/lactonase 3) ELISA Kit纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒
弗雷德里克斯堡假单胞菌LIX1抗体Human PLAC1L ELISA Kit纤调蛋白(FMOD)ELISA试剂盒
单格孢属凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体抗体Human PLAGL2 ELISA Kit纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒
草鱼出血热病毒(GCHV)检测试剂盒(荧光-PCR法)相关蛋白AKAP抗体印度刺猬因子(IHH)检测试剂盒IHH ELISA Kit
蛋白激酶A锚定蛋白6抗体吲哚2,3-双加氧酶1(IDO1)检测试剂盒IDO1 ELISA Kit
肺α/β水解酶蛋白1抗体音猬因子N端(Shh-N)检测试剂盒Shh-N ELISA Kit
水解酶结构域蛋白13抗体抑制素B(INH-B)检测试剂盒INH-B ELISA Kit
水解酶结构域蛋白14B抗体抑制素A(INH-A)检测试剂盒INH-A ELISA Kit
水解酶结构域蛋白15抗体抑瘤素M(OSM)检测试剂盒OSM ELISA Kit
肺α/β水解酶蛋白3抗体乙型肝炎核心抗体(HBcAb)检测试剂盒HBcAb ELISA Kit
三磷腺苷结合盒转运蛋白F亚3抗体乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测试剂盒HBsAg ELISA Kit
三磷腺苷结合盒转运蛋白A亚5抗体乙型肝炎表面抗体(HBsAb)检测试剂盒HBsAb ELISA Kit