使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品参数:
产品名称: 空肠弯曲菌(CJ)检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64399
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
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PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是��循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
假单胞菌氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体Human HK1(Hexokinase-1) ELISA Kit葡萄糖激酶(GCK)ELISA试剂盒
卷枝毛霉卷枝变型肠道分化干MATH-1蛋白抗体Human NCOA6 ELISA Kit葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体Human NCOA7 ELISA Kit葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)ELISA试剂盒
枯草芽胞杆菌磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MKK6抗体Human ND1 ELISA Kit葡萄糖-6-磷酸酶/葡萄糖-6-磷酸酯酶(G-6-Pase)ELISA试剂盒
香鱼假单胞菌磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体Human NCS1 ELISA Kit葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA试剂盒
球色单隔孢属单克隆抗体Human ND2 ELISA Kit脯氨酸肽酶(PEPD)ELISA试剂盒
玫瑰色库克菌线粒体铁转运蛋白1抗体Human NARF ELISA Kit脯氨酸羟化酶(PHD)ELISA试剂盒
地圆形菌磷酸化原癌基因c-Met抗体Human NAT10 ELISA Kit脯氨酸/谷氨酰富含性剪接因子(SFPQ)ELISA试剂盒
黄褐环锈伞磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体Human NDC80 ELISA Kit破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA试剂盒
隐球酵母属甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶1抗体Human NBL1 ELISA Kit破骨分化因子(ODF)ELISA试剂盒
匍枝根霉(黑根霉)胃动素受体抗体Human LIPC(Hepatic triacylglycerol lipase) ELISA Kit泼尼松龙(PS)ELISA试剂盒
荧光假单胞菌特异性MLT5蛋白抗体Human PODXL(Podocalyxin) ELISA Kit苹果酸脱氢酶1(MDH1)ELISA试剂盒
滑菇软骨基质蛋白抗体Human NCOA3 ELISA Kit平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA试剂盒
植物乳杆菌植物亚种丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体Human NCOA5 ELISA Kit平滑肌肌动蛋白(SMA)ELISA试剂盒
立枯丝核菌甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2抗体Human NCOA6 ELISA Kit嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)ELISA试剂盒
大肠埃希菌微小染色体维持缺陷蛋白2抗体Human NCOA7 ELISA Kit脾脏酪氨酸激酶(Syk)ELISA试剂盒
空肠弯曲菌(CJ)检测试剂盒(荧光-PCR法)小鼠凝血因子Ⅸ桃仁(山桃)(标准品)Human, Mouse, Rat
人角蛋白13桃叶干浸膏(标准品)Human, Mouse
大鼠N端前脑钠素桃叶珊瑚苷(标准品)Human, Mouse
小鼠凝血因子Ⅹ桃枝(标准品)Human, Mouse, Rat
人角蛋白17特女贞苷(标准品)Human, Mouse, Rat
大鼠糖皮质类固受体藤合欢(南蛇藤果)(标准品)Human, Mouse
大鼠黄体**素释放**藤黄(标准品)Human
人制瘤素M受体藤黄(标准品)Human
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子替宁(标准品)Human
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。