产品参数:
产品名称: 乙型肝炎病毒(HBV)检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64437
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
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血杆菌神经性因子ICP34.5(人单纯疱疹病Ⅰ型)抗体Human CYFRA21-1(CytokeRatin Fragment Antigen 21-1) ELISA Kit低密度脂蛋白(VLDL)ELISA试剂盒
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假灰链霉菌神经PAS结构域蛋白3抗体Human NSE(Neuron-specific Enolase) ELISA Kit激肽释放酶7(KLK 7)ELISA试剂盒
佛雷德里克斯堡假单胞菌神经增殖和分化调控蛋白1抗体Human PCT(Procalcitonin) ELISA Kit激肽释放酶6(KLK 6)ELISA试剂盒
戴尔福特菌属NOTCH调节锚蛋白抗体Human U-II(Urotensin 2) ELISA Kit激肽释放酶2(hK 2)ELISA试剂盒
大肠埃希氏菌神经囊泡膜蛋白1抗体Human CK-MB(Creatine Kinase MB) ELISA Kit激肽释放酶11(KLK 11)ELISA试剂盒
长根静灰球菌突触生长相关蛋白抗体Human GHRL(Ghrelin) ELISA Kit激肽释放酶10(KLK 10)ELISA试剂盒
虎掌菌*NDUFA9蛋白抗体Human VEGF(Vascular Endothelial Cell Growth Factor) ELISA Kit激肽释放酶1(KLK 1)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌间变性瘤激酶核相互作用伴侣蛋白抗体Human VEGF-C(Vascular Endothelial Growth Factor C) ELISA Kit敏感脂肪酶(HSL)ELISA试剂盒
传染性****病磷酸化间变性瘤激酶核相互作用伴侣蛋白抗体Human TNFRSF13C/BAFFR(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C) ELISA Kit敏感性脂肪酶(HSL)ELISA试剂盒
Formosa核仁和纺锤体相关蛋白1抗体Human TNFRSF13B/TACI(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B) ELISA Kit激活素A(Activin A)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌心脏特异性同源盒转录因子NKX2.5抗体Human VEGFR2/KDR(Vascular endothelial growth factor receptor 2) ELISA Kit激动异构酶/分裂素MB(CKMB)ELISA试剂盒
隐花青鹅膏指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体Human TNFRSF14/HVEM(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14) ELISA Kit基质衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)ELISA试剂盒
艾高夫氏亮菌核小体结合蛋白1抗体Human TNFRSF4/OX40(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4) ELISA Kit基质衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒
粗壮假丝酵母轴突蛋白1(Neurexin 1α)抗体Human TNFRSF5/CD40(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5) ELISA Kit基质衍生因子1β(SDF-1β)ELISA试剂盒
乙型肝炎病毒(HBV)检测试剂盒(荧光-PCR法)锌指转录因子Slug抗体7-表三尖杉宁 CEPHALOMANNINE, 7-EPI-(P)Human, Mouse
胚胎干抑制蛋白Suz12抗体7-表三尖杉宁 CEPHALOMANNINE, 7-EPI-(P)Human
神经突触素1抗体7-表三尖杉宁 CEPHALOMANNINE, 7-EPI-(P)Human
磷化神经突触素1抗体2',3'-二氢三尖杉宁 DIHYDROCEPHALOMANNINE, 2',3'-(P)Human
磷化神经突触素1抗体2',3'-二氢三尖杉宁 DIHYDROCEPHALOMANNINE, 2',3'-(P)Human, Mouse
酪氨蛋白激酶Fyn(同步原癌因)抗体2',3'-二氢三尖杉宁 DIHYDROCEPHALOMANNINE, 2',3'-(P)Human, Mouse
顶端体相关蛋白7抗体DIHYDROCARVYLACETATE, (+)-(SG)Human
血清应答因子结合蛋白1抗体(-)-乙二氢葛缕酯 DIHYDROCARVYLACETATE, (-)-(RG)Human, Mouse
磷化血清应答因子抗体(-)-乙二氢葛缕酯 DIHYDROCARVYLACETATE, (-)-(RG)Human, Mouse, Rat