使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品参数:
产品名称: 解脲支原体(UU)检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64441
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
强雄腐霉SH2结构域蛋白3A抗体Human TPO(Thrombopoietin) ELISA Kit肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒
假蜜环菌转化神经突起蛋白抗体Human LH(Luteinizing Hormone) ELISA Kit肌红蛋白(MB)ELISA试剂盒
血红鞘鞍单胞菌NPIP样蛋白1抗体Human TSH(Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit肌酐(Cr)ELISA试剂盒
黑曲霉老年性痴呆蛋白APH2抗体Human Surv(Survivin) ELISA Kit肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒
乳粉 三聚神经凋亡调节转化蛋白1抗体(前蛋白转化酶枯草溶菌素9)Human CLEC3B(Tetranectin) ELISA Kit肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒
根瘤菌G蛋白偶联受体147抗体Human SDC1(Syndecan-1) ELISA Kit肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)ELISA试剂盒
土味链霉菌孤儿核受体蛋白Nur77抗体Human TFF1(Trefoil factor 1) ELISA Kit饥饿(GHRL)ELISA试剂盒
微小杆菌磷酸化孤儿核受体蛋白Nur77抗体Human TFF2(Trefoil factor 2) ELISA Kit活性氧(ROS)ELISA试剂盒
构巢曲霉核凋亡诱导因子蛋白1Human TFF3(Trefoil factor 3) ELISA Kit活化素受体样激酶1(ALK1)ELISA试剂盒
酿酒酵母谷氨酸受体2C抗体Human TGFα(Transforming Growth Factor α) ELISA Kit活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒
聚生壳菌酪氨酸激酶B抗体Human REN(Renin) ELISA Kit活化凝血因子X(FXa)ELISA试剂盒
杂色曲霉NADPH氧化酶4抗体Human TFPI(Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA试剂盒
无核分布基因E同源蛋白1抗体Human PD-1/PDCD1(Programmed Cell Death Protein 1) ELISA Kit活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA试剂盒
大肠埃希氏杆菌丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK9抗体Human POSTN/OSF2(Periostin) ELISA Kit活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒
酿酒酵母磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK9抗体Human PRL(Prolactin) ELISA Kit混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)ELISA试剂盒
黑白轮枝孢多调控因子1抗体Human PRSS8(Prostasin) ELISA Kit混合反应封闭因子(MLR-Bf)ELISA试剂盒
解脲支原体(UU)检测试剂盒(荧光-PCR法)信号诱导增殖相关蛋白1样蛋白2抗体去氧胆 DEOXYCHOLIC ACID(CHOLEIC ACID)(P)Human
DNA聚合酶δ相互作用蛋白3抗体去氧胆 DEOXYCHOLIC ACID(CHOLEIC ACID)(RG)Human, Mouse, Rat
丝氨/苏氨蛋白激酶SRPK2抗体脱氧升麻烃 DEOXYACTEIN, 27-(23-EPI-26-DEOXYACTEIN)(P)Human, Mouse, Rat
分化蛋白SEPT8抗体脱氧升麻烃 DEOXYACTEIN, 27-(23-EPI-26-DEOXYACTEIN)(P)Human, Mouse, Rat
质和纺锤体机化蛋白A抗体脱氧升麻烃 DEOXYACTEIN, 27-(23-EPI-26-DEOXYACTEIN)(P)Human, Mouse
分化蛋白SEP1抗体脱氧升麻烃 DEOXYACTEIN, 27-(23-EPI-26-DEOXYACTEIN)(RG)Human, Mouse, Rat
分化蛋白SEPT10抗体脱氧升麻烃 DEOXYACTEIN, 27-(23-EPI-26-DEOXYACTEIN)(RG)Human, Mouse
分化蛋白SEPT12抗体脱氧升麻烃 DEOXYACTEIN, 27-(23-EPI-26-DEOXYACTEIN)(RG)Human, Mouse
Smad核相互作用蛋白1抗体DELPHINIDIN-3-O-RUTINOSIDE (SH)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。