使用及效果:
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
产品参数:
产品名称: 转基因大豆MON87705品系检测试剂盒(荧光-PCR法)
规格: 50T
货号:BH-P64499
公司产品仅用于科研分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延��是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
巨大芽孢杆菌原钙粘蛋白γA11抗体Anti-CCN3 AntibodyC反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒
坚强芽孢杆菌原钙粘蛋白γA12抗体Anti-CCNA1 AntibodyC多肽(CP)ELISA试剂盒
黑色附球霉原钙粘蛋白β12抗体Anti-CCNA2 Antibody(PB0402)CXC趋化因子受体7(CXCR7)ELISA试剂盒
塔宾曲霉原钙粘蛋白β3抗体Anti-CCNB1 AntibodyCXC趋化因子受体4(CXCR4)ELISA试剂盒
朱黄篮状菌原钙粘蛋白γB1抗体Anti-CCNA1 AntibodyCXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒
大肠埃希菌原钙粘蛋白γB2抗体Anti-CCNB1 AntibodyCXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA试剂盒
肠杆菌属原钙粘蛋白γB4抗体Anti-CCNB1 Antibody(PB0130)CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒
香菇原钙粘蛋白γB6抗体Anti-CCNB2 AntibodyCX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA试剂盒
胶孢镰孢原钙粘蛋白γC3抗体Anti-CCNB2 AntibodyCOP9结构光形态发生同源物亚基2(拟南芥)(COPS2)ELISA试剂盒
芥黄蜜环菌原钙粘蛋白γC4抗体Anti-CCNB1 Antibodyc-myc癌基因产物(c-myc)ELISA试剂盒
山茶磷酸蛋白聚糖PTPRZ抗体Anti-CCND2 Antibodyc-Jun氨基末端激酶/应急激活的蛋白酶(JNK/SAPK)ELISA试剂盒
杆状毛霉神经特异蛋白酪氨酸磷酸酶N5抗体Anti-CCND1 AntibodyCDCP1(CDCP1)ELISA试剂盒
猪瘟病间接荧光检测试剂盒足表达蛋白/转录因子21抗体Anti-CCND3 Antibody(PB0131)CD8分子(CD8)ELISA试剂盒
Bacillus tequilensis孕受体抗体Anti-CCND1 AntibodyCD82分子(CD82)ELISA试剂盒
枯草芽孢杆菌神经突触蛋白PCLO抗体Anti-CCND1 AntibodyCD73分子(CD73)ELISA试剂盒
诺尔氏菌早老素γ分泌酶2抗体Anti-CCP110 AntibodyCD6分子(CD6)ELISA试剂盒
转基因大豆MON87705品系检测试剂盒(荧光-PCR法)人色素P450家族成员24A1(CYP24A1)酶联免吸附测定试剂盒 Human MAPK7 ELISA Kit载脂蛋白L3抗体
人纤维胶凝蛋白1(FCN1)酶联免吸附测定试剂盒 Human MAPK6 ELISA Kit肿瘤/抗原81抗体
人抗髓磷脂抗体IgA(AMA IgA)酶联免吸附测定试剂盒 Human MAPKBP1 ELISA Kit共济失调蛋白7样2抗体
人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)酶联免吸附测定试剂盒 Human Marcks ELISA Kit盐耐药蛋白ARS2抗体
人免球蛋白G Fc段结合蛋白(FcγBP)酶联免吸附测定试剂盒 Human MAPRE2 ELISA Kit芳香基硫酸酯酶1抗体
人免球蛋白G Fc段低亲和力受体IIIa(FcγR3A)酶联免吸附测定试剂盒 Human MAN1A2 ELISA Kit盐转运三磷酸腺苷酶抗体
人抗中性粒弹性蛋白酶抗体(ANEA)酶联免吸附测定试剂盒Human MAP4K4 ELISA Kit精氨酸tRNA的蛋白转移酶1抗体
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
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