样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
|
凋亡诱导因子试剂盒
|
规格
|
48T/96T
|
货号
|
BH-0012046
|
保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
2400 ng/L
|
5 号标准品
|
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
1200ng/L
|
4 号标准品
|
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
600ng/L
|
3 号标准品
|
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
300ng/L
|
2 号标准品
|
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
150ng/L
|
1 号标准品
|
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
|
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
5羟色胺大鼠补体片断3a5-Hydroxytryptamine
乙酰胆碱人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3acetylcholine
ATP酶人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2ATPase
α淀粉酶1大鼠卵泡抑素α-Amylase 1
β内酰胺酶小鼠卵巢癌标志物CA125β-lactamase
碱性唾液脯氨酸丰富蛋白3大鼠组织蛋白去乙酰化酶Basic Salivary Proline Rich Protein 3
酶原粒蛋白16同源物B小鼠癌标志物-CA153Zymogen Granule Protein 16 Homolog B
白细胞弹性蛋白酶抑制因子人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1Leukocyte Elastase Inhibitor
磷酸二酯酶5人黑色素瘤标记物phosphodiesterases 5
短腭肺鼻腔上皮癌关联蛋白2小鼠胃肠癌标志物CA199BPI fold-containing family A member 2
促胰液素大鼠E选择素secretin
山梨醇大鼠甲基化酶Sorbitol
鸟苷三磷酸环化水解酶1小鼠血红素氧合酶1GTP Cyclohydrolase I
细胞周期素B1人高分子量角蛋白Cyclin-B1
新孢子虫病小鼠磷脂酶A2Neosporosis
凋亡诱导因子试剂盒1-基硅烷-1-己炔 98%N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀酸亚基)脲六氟磷酸盐 98% 好Anti-Phospho-CDK2 (Thr160) 磷酸化周期素依赖性激酶2抗体
三乙基3-甲基-4-膦酰基-2-保泰松 80%三(N,N-四亚甲基)磷酰 98%Anti-CDK3 周期素依赖性激酶3抗体
四氢对苯醌 Indicator1-对甲苯磺酰基-3-硝基-1,2,4-三唑 98%Anti-CDK4 周期素依赖性激酶4抗体
三(4 -甲氧基- 3 ,5 -二甲苯基)膦 500mg1-对磺酰咪唑 99%Anti-CDK5 周期素依赖性激酶5抗体
2-基硅乙炔基噻吩 97%O-(N-琥珀酰亚基)-N N N'N'-四甲基��氟酸脲 97%Anti-CDK6 周期素依赖性激酶6抗体
四基硫酸氢铵 离子对色谱级,≥99.0% (T)2,4,6-三吡啶基三 99% Anti-CDK7 周期素依赖性激酶7抗体
(±)-α-烟酸酚三(2-羧乙基)膦盐酸盐 98%Anti-CDK8 周期素依赖性激酶8抗体
氯化铥(III) 无水 粉末,99.9% metals basis叠氮基基硅烷 93%Anti-CDK9 周期素依赖性激酶9抗体