钙非依赖型磷脂酶A2试剂盒

公司产品仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

保存条件：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）。
有效期：6个月
存储运输：低温避光，请勿重压，轻拿轻放（现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。）
Elisa试剂盒可测种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床。
样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

组成及试剂配制 :
1. 酶联板：一块(96孔) 
2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

样本收集及储存：
1. 细胞培养上清：
将细胞培养基移至无菌离心管，在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
2. 血清样本：
室温血液自然凝固 20 min 后，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小时内检测可放入 2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。
3. 血浆样本：
将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择 EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合 20 min，在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min，然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存（24小时内检测可放入 2-8℃储存），避免反复冻融。
N钙粘着蛋白;上皮性钙黏附蛋白大鼠C肽N-Cadherin

溶酶体关联膜蛋白1人去氨加压素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加压素Lysosomal Associated Membrane Protein 1

3甲基组氨酸大鼠绒毛膜促性腺3-methylhistidine

卵磷脂人蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M3Lecithin

血小板内皮细胞粘附分子6大鼠促黄体Platelet;Endothelial Cell Adhesion Molecule 6

蛋白质二硫键异构酶大鼠抗心肌抗体protein disulfide isomerase

可溶性细胞活化基因-3人睾酮受体soluble 1ymphocyte activation gene3

含NLR家族CARD域蛋白4大鼠抗中性粒/中心体抗体NLR family CARD domain-containing protein 4

N（ε）羧乙基赖氨酸人蕈碱型乙酰胆碱受体N(epsilon)(carboxyethyl)lysine

可溶性淀粉酶前体蛋白β大鼠磷脂酰肌抗体IgG/IgMsoluble amyloid precursor protein β

可溶性鸟苷酸环化酶人糖蛋白49Asoluble guanylate cyclase

环磷酰胺人抑制素β-BCyclophosphamide

心脏特异性同源盒转录因子NKX2.5大鼠复合前列腺特异性抗原Homeobox protein Nkx-2.5

线粒体呼吸链复合物Ⅴ大鼠胰蛋白酶complex Ⅴ

胼胝质合成酶人食欲素受体glucan synthase-Like 5;
钙非依赖型磷脂酶A2试剂盒曙红Y,溶 AR碳酸钠，十水 AR，99%Anti-APOA1  载脂蛋白A1抗体

曙红Y(水溶) ACS氟酸 AR,40.0%Anti-FASN  脂肪酸合成酶抗体

荧光素 AR,90%二甲苯 GCS,≥99.9%(GC)(二甲苯异构体+乙基苯）Anti-Apo B  载脂蛋白B抗体

荧光素 IND二甲苯 AR，99%(二甲苯异构体+乙基苯Anti-FAST kinase  Fas活化的丝/苏氨酸激酶抗体

荧光素钠 AR二甲苯 CP，98%(二甲苯异构体+乙基苯）Anti-FasL  兔抗FasL抗体。

吉氏色素 BS二甲苯 HPLCAnti-fatty acid elongase  脂肪酸延长酶抗体

铬酸铅 AR,98.0%二甲苯 ACS, 98.5% (isomers plus ethylbenzene)Anti-Fc gamma RII a/CD32a  球蛋白G Fc段受体Ⅱ抗体

甲基蓝 ARACS, 98.5+% (isomers plus ethylbenzene)Anti-FBN1  原纤维蛋白1抗体
操作步骤：
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.         加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.         弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。
5.         温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔��底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.         依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.         用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。