样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
产品名称
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磷酸化酪氨酸激酶试剂盒
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规格
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48T/96T
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货号
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BH-0012433
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保存条件:2-8℃(长期不使用时,部分试剂应放在-20℃条件下)。
有效期:6个月
存储运输:低温避光,请勿重压,轻拿轻放(现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。)
Elisa试剂盒可测种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
Elisa试剂盒适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床。
2400 ng/L
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5 号标准品
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150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
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1200ng/L
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4 号标准品
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150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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600ng/L
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3 号标准品
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150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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300ng/L
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2 号标准品
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150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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150ng/L
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1 号标准品
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150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
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组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本收集及储存:
1. 细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在 4℃条件下 1000 ×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
2. 血清样本:
室温血液自然凝固 20 min 后,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小时内检测可放入 2-8℃储存),保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3. 血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择 EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 20 min,在 4℃条件下 1000×g 离心 10 min,然后将上清等量分装于小 EP 管并于-20℃下保存(24小时内检测可放入 2-8℃储存),避免反复冻融。
操作步骤:
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液)100μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)试剂盒Human MAD1L1(Mitotic arrest deficient 1-like protein 1) ELISA Kit腺样癌特异性相关抗原EMC1抗体
大鼠血小板/内皮粘附分子(PECAM1)试剂盒Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) ELISA KIT硫酸软骨素蛋白多糖3抗体
大鼠血小板白C激酶底物同源性样域家族A成员2(PHLDA2)试剂盒Human HBXIP(Hepatitis B virus X-interacting protein) ELISA Kit染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1抗体
大鼠多效生长因子(PTN)试剂盒Human MST1R(Macrophage-stimulating protein receptor) ELISA Kit磷酸化转录因子ELK1抗体
大鼠足标志蛋白(PCX)试剂盒Human LOR (Loricrin) ELISA KITETS相关蛋白71抗体
大鼠脊髓灰质炎病受体相关蛋白1(PVRL1)试剂盒Human LRTM1 (Leucine-rich repeat and transmembrane domain-containing protein 1) ELISA KIT外胚层发育不佳蛋白1抗体
大鼠脊髓灰质炎病受体相关蛋白2(PVRL2)试剂盒Human LDLRAP1 (Low density lipoprotein receptor adapter protein 1) ELISA KITETV3L蛋白抗体
大鼠正向辅助因子4(PC4)试剂盒Human LRRN4CL (LRRN4 C-terminal-like protein) ELISA KIT酪氨酸蛋白激酶受体B6抗体
大鼠前白蛋白(PA/PLB)试剂盒Human LECT1 (Leukocyte cell-derived chemotaxin 1) ELISA KIT溶血磷脂酸受体蛋白1抗体
大鼠凝血因子XI(FXI)试剂盒Human LZTR1 (Leucine-zipper-like transcriptional regulator 1) ELISA KIT溶血磷脂酸受体蛋白2抗体
大鼠前心钠肽(Pro-ANP)试剂盒Human LCP2 (Lymphocyte cytosolic protein 2) ELISA KIT溶血磷脂酸受体蛋白3抗体
大鼠前降钙素(PCT)试剂盒Human LYL1 (Protein lyl-1) ELISA KIT内皮的分化蛋白6抗体
大鼠I型前胶原N端前肽(PINP)试剂盒Human POMC(Pro-opiomelanocortin) ELISA Kit外生性骨疣样蛋白2抗体
大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)试剂盒Human SEMG2(Semenogelin-2) ELISA Kit磷酸化eIF4E结合蛋白抗体
大鼠III型前胶原氨基端肽(PIIINP)试剂盒Human LMCD1 (LIM and cysteine-rich domains protein 1) ELISA KIT磷酸化eIF4E结合蛋白抗体
磷酸化酪氨酸激酶试剂盒2-氯环戊酮 98%三(三苯基膦)羰基氢化铑(I) Rh 11.2% Anti-CD172a/SIRP Alpha/FITC 荧光素标记信号调节蛋白α抗体IgG
二甲氧烷 98%羰酰二氢三(三苯基膦)钌(II) 99%Anti-NCF/NCF4/p40phox/FITC 荧光素标记嗜中性粒胞浆因子4抗体IgG
2,5-二甲基-2,4-己二烯 97%,含60-100ppm BHT稳定剂羰酰二氢三(三苯基膦)钌(II) 99%Anti-nck2/FITC 荧光素标记NCK衔接因子蛋白2抗体IgG
3,5-二氟苯甲 97%对伞花烃二氯化钌二聚体 Ru:33.0%Anti-NCOA2/KAT13C /FITC 荧光素标记核受体辅助激活蛋白2抗体IgG
2,3-二溴-1-烯 technical, ≥85% (GC)(1,5-环辛二烯)二氯化钯(II) Pd 37.3%Anti-NCoR1 /FITC 荧光素标记核受体辅助抑制因子1抗体IgG
2,3-二溴-1-烯 高纯级,95%[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯 Pd 14.5% Anti-NCoR2/FITC 荧光素标记核受体辅助抑制因子2抗体IgG
**菊酸乙酯 95%(1,5-环辛二烯)二氯化钌(II) Ru 35.8-36.1% Anti-NCX1/FITC 荧光素标记钠钙交换蛋白1抗体IgG
3-甲基-2--1- 98%双(三苯基膦)二氯化钯(Ⅱ) Pd 15.2%Anti-NCX2/SLC8A2/FITC 荧光素标记钠钙交换蛋白2抗体IgG
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