吉西他滨

实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 

2．所使用的盖玻片应该为玻璃**，并经过铬酸洗液处理； 

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

培养方法

传代方法 将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；

生长条件 37℃，5%CO2，CM1-1培养液。CM1-1培养液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培养液，含谷氨酰胺，含丙酮酸钠。

存储条件 冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，货期短，价格优，公司产品仅用于科研售后齐全。

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。 

细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Tissue Specificity : Skeletal muscle, liver, heart and kidney.

Similarity : Belongs to the nuclear hormone receptor family. NR1 subfamily. Contains 1 nuclear receptor DNA-binding domain.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q07869.2

英文名称  Anti-Protor-1

中文名称  乳腺癌抑制基因Protor1抗体

别    名  Arhgap8; AU043908; C030017C09Rik; C78947; FLJ20185; FLJ20185k; MGC109513; MGC32512; PP610; Proline rich 5 (renal); Proline-rich protein 5; Protein observed with Rictor-1; Protor-1; PROTOR1; PRR5; PRR5_HUMAN; PTOR1; RP1-181C9.3.

浓    度  1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源  Rabbit  

克隆类型  polyclonal

交叉反应  Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow

产品类型  一抗    

研究领域  肿瘤 细胞生物 学 染色质和核信号 信号转导 细胞凋亡 表观遗传学  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 43kDa

性    状  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human Protor-1

亚    型  IgG

纯化方法  affinity purified by Protein A
吉西他滨合胞素1检测试剂盒D-果糖 Ph. Eur., BP,USP(R)-(-)-N,N-二甲基-1-(2-联苯膦基）二茂铁乙 97%

反应蛋白7A域受体抗体检测试剂盒D-果糖 99%，用于培养(S)-(+)-N,N-二甲基-1-(2-联苯膦基）二茂铁乙 97%

难辨梭状芽孢杆菌素A检测试剂盒甘露 AR,98.0%2,3,5,6-四氟-7,7,8,-四二甲基对苯醌 97%

辅酶A-SH检测试剂盒1-甲基哌 99%三（2,4-二甲苯基）膦 97%

N-酰辅酶A检测试剂盒1-甲基哌 分析标准品，≥99.5% (GC)7,7,8,8-四基苯醌二 98%

产素幽门螺杆菌抗体IGG检测试剂盒4,4'-二苯乙烯二羧酸 96%三(2-呋喃基)膦 99%

二酰辅酶A检测试剂盒对甲基 99%4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽  98%