复苏专用因子

冷冻保存细胞之方法

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。

冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施��化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

培养操作：

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.

Function : Converts noradrenaline to adrenaline.

Similarity : Belongs to the NNMT/PNMT/TEMT family.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P11086.1

PNMT又称去甲肾上腺素N-甲基转移酶,其作用；催化将甲基从S-腺苷酰甲硫氨酸转移到去甲肾上腺素的氨基端**肾上腺素反应的酶。一般认为：嗜铬细胞胞浆中存在大量的PNMT，可使去甲肾上腺素甲基化而成肾上腺素（另一个**肾上腺素的方式）。

英文名称  Anti-PRDX5/PRDX6

中文名称  过氧化还原酶5/6抗体

别    名  1 Cys; 1 Cys peroxiredoxin; 1 Cys PRX; 1 cysPrx; 24 kDa protein; Acidic calcium independent phospholipase A2; aiPLA2; Antioxidant protein 2; AOP2; Aop2 rs3; Brp 12; Ciliary body glutathione peroxidase; CP 3; GPx; Liver 2D page spot 40; Ltw4; Lvtw 4; Non selenium glutathione peroxidase; NSGPx; ORF06; p29; Peroxiredoxin6; Peroxiredoxin 6; Peroxiredoxin-6; Peroxiredoxin5; Peroxiredoxin 5; Peroxiredoxin-5; PHGPx; Phospholipase A2 lysosomal; PLA2; PRDX 6; Prdx5; PRDX6; PRX; Red blood cells page spot 12; Thiol specific antioxidant protein; AA690119; Prdx6 rs3.

浓    度  1mg/1ml

规 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg

抗体来源  Rabbit  

克隆类型  polyclonal

交叉反应  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

产品类型  一抗    

研究领域  肿瘤 细胞生物 学 细胞凋亡 干扰素  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 18/25kDa

性    状  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human Peroxiredoxin 6 (55-100aa)

亚    型  IgG
复苏专用因子丝酸酮酸氨基转移酶检测试剂盒2,5-二氯苯甲酸 97%沙丁 分析标准品（剧品）

可溶性CD25检测试剂盒2,3-二甲酸 98%沙丁 99%（剧品）

核苷二磷酸激酶A检测试剂盒2,4-二甲酸 98%2,4,5-三氟 98%

低氧诱导因子1α抗体检测试剂盒2,2-二甲基丁酸 98%二乙氨基乙 99%

白介素1受体抗体检测试剂盒2,5-二甲酸 98%二乙氨基乙 99.5%

前列腺素检测试剂盒2,4-二氯-5-磺酰基苯甲酸 98%盐酸普鲁卡因 99%

幽门螺杆菌IgA抗体检测试剂盒3,5-二氨基苯甲酸 98%盐酸普鲁卡因 分析标准品
细胞处理方法：

以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考，具体操作还需要根据到货时细胞密度，细胞生长状态等具体情况，酌情处理，如需要更详细技术指导。

一．贴壁细胞

客户接收到细胞，用75%的酒精（建议配制75%酒精的水是过的）培养瓶外部。

肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。

显微镜观察细胞，当细胞融汇至80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。

严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。1000rpm,5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO2  培养。

二．悬浮细胞

1. 接收到细胞，用75%的酒精（建议配制75%酒精的水是过的）培养瓶外部。

2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。

3. 严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒）。

5. 1000rpm,5min离心，重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃,5%CO2培养。