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产品名称
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规格
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货号
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成纤维细胞生长因子
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10ug
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BH-X020049
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培养方法
传代方法 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;
生长条件 37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。
存储条件 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为玻璃**,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
SwissProt: Q5JVF3 Human
SwissProt: Q8BFV2 Mouse
Unigene: 741363 Human
Unigene: 103427 Mouse
英文名称 Anti-PAPSS1
中文名称 腺苷酸硫酸激酶1抗体
别 名 Adenylyl-sulfate kinase; Adenylylsulfate 3''-phosphotransferase; APS kinase; ATP-sulfurylase; ATPSK 1; ATPSK1; Bifunctional 3' phosphoadenosine 5' phosphosulfate synthetase 1; PAPS synthase 1; PAPS synthetase 1; PAPS1_HUMAN; PAPSS 1; PAPSS; PAPSS1; SAT; SK 1; SK1; Sulfate adenylate transferase; Sulfurylase kinase 1; 3 prime phosphoadenosine 5 prime phosphosulfate synthase 1; 3' phosphoadenosine 5' phosphosulfate synthase 1; 3''-phosphoadenosine-5''-phosphosulfate synthase; Adenosine-5''-phosphosulfate 3''-phosphotransferase.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 69kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PAPSS1
亚 型 IgG
成纤维细胞生长因子凝血因子IV检测试剂盒耐尔兰 Dye content ≥75 %双(基硅烷基)氨基 1 M in THF (约22%含量)
凝血因子V检测试剂盒蛋白酶K 用于分子生物学,≥30 units/mg protein双(基硅烷基)氨基 0.7M in toluene(15%甲苯溶液)
凝血因子Ⅶ检测试剂盒玫瑰红酸 AR基氯化镁 2.0M 四溶液
凝血因子Ⅷ检测试剂盒二甲苯青FF 分子生物学级双(基硅烷基)氨基钠 98%
凝血因子Ⅸ检测试剂盒5-溴-4氯-3吲哚基β-D 半乳糖 99%双(基硅烷基)氨基钠 1.0 M 四溶液(21%)
凝血因子Ⅺ检测试剂盒红色氧化铅 98%双(基硅烷基)氨基钠 2.0 M 四溶液(40%)
凝血因子XII检测试剂盒2-羟基-3-萘甲酸 97%苯酚钠 90%