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产品名称
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规格
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货号
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胰蛋白酶抑制剂
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100mg
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BH-X020055
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培养方法
传代方法 将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；
生长条件 37℃，5%CO2，CM1-1培养液。CM1-1培养液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培养液，含谷氨酰胺，含丙酮酸钠。
存储条件 冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯���射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为玻璃**，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
Tissue specificity:
Highest expression in the megakaryocytes of the bone marrow, lower in mature megakaryocytes, in platelets and in a variety of other tissues such as heart and gut.
Function : Receptor for activated thrombin coupled to G proteins that stimulate phosphoinositide hydrolysis.
Subcellular Location : Cell membrane.
Tissue Specificity : Highest expression in the megakaryocytes of the bone marrow, lower in mature megakaryocytes, in platelets and in a variety of other tissues such as heart and gut.
Post-translational modifications : A proteolytic cleavage generates a new N-terminus that functions as a tethered ligand.
Similarity : Belongs to the G-protein coupled receptor 1 family.
英文名称 Anti-PBLD
中文名称 MAWD结合蛋白抗体
别 名 MAWBP; MAWD binding protein; MAWD-binding protein; MAWDBP; PBLD; PBLD_HUMAN; Phenazine biosynthesis like domain containing protein; Phenazine biosynthesis like protein domain containing; Phenazine biosynthesis-like domain-containing protein; Unknown protein 32 from 2D page of liver tissue; Unknown protein 32 from 2D-page of liver tissue; FLJ14767; FLJ35507; OTTHUMP; OTTHUMP.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Cow, Horse
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 32kDa
胰蛋白酶抑制剂凝血因子Ⅱa检测试剂盒N-乙酰-D-蛋氨酸 99%氢化 97%
髓样分化蛋白2检测试剂盒N-CBZ-D-氨酸 96%红铝溶液 70 wt%甲苯溶液
五型腺病抗原检测试剂盒DL-氨酸甲酯盐酸盐 98%盐酸苯吖啶 ≥98% (HPLC)
破伤风类素IgG抗体检测试剂盒L-天门冬氨酸-4-叔丁基酯 98%1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐 98%
糖蛋白95检测试剂盒N-乙酰-D-色氨酸 98%1-溴-3,5-二甲基金刚烷 98%
肝素结合性表皮生长因子检测试剂盒D-氨基 98%2-氯乙基乙基硫 97%
脑红蛋白检测试剂盒D-a-氨基己二酸 97%4-甲基-2-酮基戊酸钙 98%