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中文名称 抗体
货号:BJ-205586
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物**实验。
4、试取血样进行测试,查看**效果。
5、如果**成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联**吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
3)真核翻译起始因子2C2抗体的亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。
"1套 CN/DAB 底物套装 CN/DAB -20℃避光保存
50mL ABTS 溶液,7mM ABTS Solution -20℃避光保存
25g OPD 干粉 OPD,Powder 避光保存
1g ONPG 干粉 ONPG,Powder -20℃保存
1g pNPP 干粉 pNPP 避光保存
1张 硝酸纤维素膜,13×20 cm(Tiandz) Nitrocellulose Membrane 常温保存
1张 硝酸纤维素膜,13×20 cm (Amersham) Nitrocellulose Membrane 常温保存
1张 尼龙膜,13×20 cm Nylon Membrane (Pharmacia) 常温保存
1张 PVDF膜,0.45 μm,13×20 cm PVDF Membrane (Millipore) 常温保存
250mL 氨基黑染膜液 Amido Black 10B BlotStain 避光保存
250mL 丽春红S染膜液 Ponceau S BlotStain 避光保存
20L 湿法电转液(干粉) Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存
20L 半干法电转液(干粉) Half-Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存
人 LCP1 基因全长ORF克隆
人 CCDC22 基因全长ORF克隆
人 CEP68 基因全长ORF克隆
抗体人 RIPK2 基因全长ORF克隆
人 CYP4F11 基因全长ORF克隆
人 OXCT1 基因全长ORF克隆
人 PACSIN2 基因全长ORF克隆
人 ARFGAP1 基因全长ORF克隆
人 MSC 基因全长ORF克隆
人 PFKP 基因全长ORF克隆
人 PI4KB 基因全长ORF克隆"
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以**病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或**的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的**球蛋白,可结合不同种的细胞,参与**应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:**球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
**。**球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染**的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生**应答的性能。不同的**球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从**血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。