细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
英文简称
规格
货号
GC-2 SPd(ts):GC2 SPdts
1×106
P-X1051
产品详情：
细胞别称：GC-2
种属来源：小鼠
年龄性别：6周龄
组织来源：精母细胞；SV40大T抗原转染
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
背景简介：GC-2spd(ts)是通过稳定共转染新鲜分离的带有SV40大T抗原基因(pSV3neo，见ATCC 37150)的精母细胞和p53抑癌基因的温度敏感突变体(LTRp53cG9)而建立的。用G-418筛选细胞，培养6个月，限制稀释三次克隆单细胞。在软琼脂培养中未观察到克隆增殖，说明这些细胞是永生的。
生物等级：2
细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测：无
基因表达情况：
保藏机构：ATCC; CRL-2196 BCRC; 60313
培养基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
倍增时间：
STR鉴定位点18-3:16,17；6-7:17；5-5:14,17,18,19；X-1:28；1-2:13,19；7-1:26.2,29；8-1:16；1-1:17；19-2:13；15-3:22.3；12-1:17；6-4:18；4-2:20.3；3-2:14；2-1:16；13-1:15.2,17.1；11-2:16；17-2:15；
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜
。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
实验原理：
公司正在出售的产品：
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植物维生素D2(VD2)elisa分析检测试剂盒 |
干扰素调节因子8抗体 |
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VD2 ELISA Kit |
明胶载玻片 |
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人催产素受体(OXTR)elisa分析检测试剂盒 |
CA12 |
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HumanOXTRELISAKit |
碳酸酐酶12抗体 |
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小鼠促卵泡素(FSH)elisa检测试剂盒 |
IRF8 |
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二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶（Rubisco）测试盒 |
RAB5B |
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细胞化学AP酶联NBT/BCIP完全间接检测试剂盒（含一抗和AP二抗） |
丝裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗体 |
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RAS相关蛋白Rab5B抗体 |
JIP2 |
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Cy5.5标记的羊抗兔IgG H&L |
去泛素化酶3抗体 Anti-USP3 |
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Goat Anti-Rabbit IgG H&L / Cy5.5 |
26S蛋白酶调节亚型S5a抗体 Anti-Proteasome 19S S5A |
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FXL19蛋白抗体 |
桥粒斑菲素蛋白2抗体 Anti-Plakophilin 2 |
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FXL19 |
信号诱导增殖相关蛋白1抗体 Anti-SIPA1 |
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牛纤维蛋白原(Fb)elisa分析检测试剂盒 |
小鼠高灵敏度促甲状腺(U-TSH)elisa分析检测试剂盒 |
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Fb Elisa Kit |
GC-2 SPd(ts)小鼠精母细胞系U-TSHELISAKit |
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仓鼠白介素1α(IL-1α)elisa分析检测试剂盒 |
人电压门控钾通道(VGKC)elisa分析检测试剂盒 |
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IL-1α ELISA Kit |
VGKCELISAKit |
实验步骤：
1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。
