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讲解ELISA试剂盒效果"花板"的问题
关于ELISA试剂盒效果"花板"的问题对检测数据造成了很大影响,往往会使检测者做出误判,是实验中有必要要注意和避免的。
针对这种"花板"现象我们通过屡次实验的分析和判别,总结了一些阅历,分析如下:
1 、标本、试剂、仪器
1.1 标本 出入境人员的血液标本。
1.2 试剂 HBsAg、HCV、HIV、梅毒试剂均为不同厂家的ELISA试剂盒。
1.3 仪器 LD4-2型脑心计BID RAD1575型洗板机BID RAD550酶标仪。
2、 办法
全部被检出入境人员的血液标本,按照各个厂家供应的ELISA试剂盒说明书进行HBsAg-HCV-HIV梅毒等查验项目操作。全部试剂均在有用期内运用。
3 、效果
所运用不同厂家的试剂有时会出现"花板"问题。
4 、分析
在全部标本进行检测的进程中,所用的仪器及加样进程都处于正常状况的情况下,进程均按照各种试剂说明书的要求去做,扫除实验所用仪器和操作进程对实验效果的影响外,ELISA试剂盒内的空白、阴性和阳性对照以及室内质控值都很正常,只要检测的血液标本情况异常。根据国家和疾控中心陈述阳性率的份额不该该是很高的情况下,HBsAg在用ELISA之前都通过了快速金标试剂的检测,阳性标本得到了必定的控制。因此,原因可能是在标本的处理,特别是放置时间、离心速度和离心时间方面的问题。所以,标本的处理就成为实验效果的首要可疑要素。
为了避免"花板"现象的出现,下降检测的假阳性率,获取准确的实验效果,应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作便当省时的ELISA试剂。
运用ELISA试剂盒对血液HBsAg-HCV-HIV及梅毒等实验检测的效果中,空白和阴性,阳性对照以及室内质控孔效果正常,根据卫生部临检中心供应的数据,HBsAg0.5ng1ng-HCV-HIV梅毒正常规划均为2NCU,但血液标本孔的OD值比较高(大多数OD值≥0.070)。标本的阳性率很高,每板除对照孔外,有时阳性高达10孔之多,而大多数真阳性标本都出现弱阳性效果。
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