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分光光度法简介
分光光度法简介
分光光度法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立起来的方法,属于分子吸收光谱分析。当光通过溶液时,被测物质分子吸收某一波长的单色光,被吸收的光强度与光通过的距离成正比。在波长、溶液和温度确定的情况下,测得的摩尔消光系数是由给定物质的特性决定的。
实际上,分光光度法测得的摩尔消光系数也和使用的仪器有关。因此,在定量分析中,通常并不用已知物质的摩尔消光系数,而是用一个或多个已知浓度的待测物质作一条校准或工作曲线。摩尔消光系数的意义是即每升含有一摩尔核酸磷的溶液在260 nm波长处的消光值(即光密度,或称为光吸收)。其大小反映吸光物质对光的吸收能力,也反映了用吸光度法测定该吸光物质的灵敏度。
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