WB抗原抗体反应流程： a. 0.1% TBST润洗封闭后的NC膜3次，每次5 min； b. 稀释一抗：稀释液通常为脱脂牛奶或0.1% TBST，比例通常为1：1000（稀释比例参见抗体说明书）； c. 孵育一抗：4 ℃下摇床，过夜封闭； d. 回收一抗，-20℃保存供重复使用，0.1% TBST润洗NC膜3次，每次5 min； e. 孵育二抗：0.1% TBST稀释HRP标记的对应种属的二抗，比例为1：5000-1：10000，室温下摇床孵育60 min； f. 0.1% TBST润洗NC膜3次，每次10 min； tips：抗体孵育条件、时间等详见《【Western-Blotting】WB核心理论：抗原抗体特异性反应》；