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PCR反应产物量过少分析

 PCR反应产物量过少分析:

(1)退火温度不合适。以2度为梯度设计梯度PCR反应优化退火温度。

(2)DNA模板量太少。增加DNA模板量。

(3)PCR循环数不足。增加反应循环数。

(4)引物量不足。增加体系中引物含量。

(5)延伸时间太短。以1kb/分钟的原则设置延伸时间。

(6)变性时间过长。变性时间过长会导致DNA聚合酶失活。

(7)DNA模板中存在抑制剂。确保DNA模板干净