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PCR反应平台效应是什么?
“平台效应”是指PCR后期循环产物累积趋于饱和,使原来以指数增长的速率变成平坦的曲线,同时出现非特异产物的大量增加的现象。下列因素可能与平台效应有关:
(1)dNTP或引物的消耗量。
(2)反应物的稳定度(dNTP或酶)
(3)zui 终产物的阻化作用(焦磷酸盐、双链DNA)。
(4)非特异产物或引物二聚体与反应物的竞争。
(5)产物在高浓度时变性不完全,影响引物的延伸。
(6)酶与PCR产物的结合,使酶分子减少。
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