生化检测常见样本的收集方法:
1. 血清样本
取新鲜血液,在25℃条件下静置30 min使血液凝结。4℃,2000×g离心15 min,取上层淡黄色澄清液体即为血清。血清置于冰上待测,若不能当天检测,于-80℃保存,可储存一个月。
2. 血浆及红细胞样本
取新鲜血液加入含有抗凝剂的试管中,颠倒混匀,4℃,700-1000×g离心10 min,取上层淡黄色透明液体即为血浆,不能吸取中间白色干扰层(白细胞和血小板)。将血浆置于冰上待测,若不能当天检测,于-80℃保存,可储存一个月。
将中间白色干扰层舍去,将下层红细胞沉淀,用4倍体积2-8℃的超纯水裂解,于4℃,10000×g离心15 min,上清液即为红细胞溶解物。
3. 全血样本
取新鲜血液加入到盛有抗凝剂的管中,轻轻颠倒混匀,置于冰上待测。若不能当天检测测,4℃保存2天。
4. 尿液样本
收集新鲜尿液,4℃,10000×g离心15 min,取上清于冰上待测。若不能当天测,放入-80℃保存,可储存一个月。
5. 胸水样本
收集新鲜胸水,加入含有抗凝剂的试管中,4℃,1500×g离心10 min,取上清于冰上待测,若不能当天测,保存在-80℃中,可储存一个月。
6. 脑脊液样本
将收集的脑脊液,4℃,1500×g离心10 min,取上清于冰上待测,若不能当天测,保存在-80℃中,可储存一个月。
7. 高脂血清样本
① 高速离心法:
于4℃,10000×g离心15 min后,用棉签吸弃上层乳白色液体,吸取中层澄清血清于冰上待测。
② 乙醚萃取法:
取血清与乙醚1:1混合,涡旋混匀仪震荡30秒,室温静置5分钟,4℃,1500×g离心5 min,枪头穿过乙醚层,取下层清亮血清进行测量。[1]
③ 生理盐水稀释法:
将血清与生理盐水按照1:4(具体稀释倍数按照指标确定)稀释后混匀待测(适用于轻度高脂样本)。
④ 沉淀分离法:
将血清用联合沉淀剂磷钨酸-镁沉淀剂或者聚乙二醇-硫酸葡聚糖沉淀剂沉淀[2],4℃,1500×g离心10 min后,取上清待测。(具体沉淀剂的种类及浓度需要按指标确定)。