PCR反应产物量过少原因与解决方案参考:
1、退火温度不合适。以 2 ℃ 为梯度设计梯度 PCR 反应优化退火温度。
2、DNA 模板量太少。增加 DNA 模板量。
3、PCR 循环数不足。增加反应循环数。
4、引物量不足。增加体系中引物含量。
5、延伸时间太短。以 1 kb/分钟的原则设置延伸时间。
6、变性时间过长。变性时间过长会导致 DNA 聚合酶失活。
7、DNA 模板中存在抑制剂。确保 DNA 模板干净。