上海抚生实业有限公司
新增产品
|
公司简介
注册时间:
2021-06-18
联系人:
电话:
Email:
首页
公司简介
产品目录
公司新闻
技术文章
资料下载
成功案例
人才招聘
荣誉证书
联系我们
产品目录
科研抗体
多克隆抗体
对照品
植物对照品
细胞
细胞基础培养基
原代细胞培养
细胞系
菌种
ATCC菌种
A类
进口生化检测试剂盒
科研细胞
科研菌种
试剂盒
进口ELISA试剂盒
生化试剂
其它化学试剂
植物**及核酸类
碳水化合物类
色素类
培养基类
酶类
***类
缓冲剂类
分离材料及耗材类
蛋白质类
ELISA试剂盒
其它ELISA试剂盒
进口ELISA试剂盒
生化检测试剂盒
其他
抗体类产品
细胞培养基产品
酶试剂产品
分子生物学产品
Western Blot系列产品
Apoptosis系列产品
染液类产品
常用生化类试剂盒
抗氧化检测试剂及科研试剂
PCR检测试剂盒
PCR检测试剂盒
恒温扩增法
PCR-荧光探针法
恒温荧光法
荧光PCR法
当前位置:
首页
>>>
技术文章
>
技术文章
细胞适应无血清培养基的方式叙述
细胞适应无血清培养基的方式叙述:
1. 直接适应——细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中。
一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应无血清培养基。对于直接适应,接种细胞密度应该:2.5×105~3.5×105细胞/ml。当细胞密度达到1×106~3×106细胞/ml时,传代培养细胞。当细胞密度在培养4到7天后达到2×106~4×106细胞/ml时,细胞wan全适应了无血清培养基。每隔3~5天,当细胞密度达到1×106~3×106细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。
2. 连续适应——分好几步把细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中,与直接适应相比较,连续适应趋向对于细胞更加温和一些。
(1)、以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基:25%SFM混合培养基中,传代培养。
(2)、当细胞密度>5×105细胞/ml时,以2×105到3×105细胞/ml细胞密度,在有血清培养基:SFM为50∶50的混合培养基中传代培养。
(3)、以2×106到3×106细胞/ml细胞密度,25%有血清培养基和75%SFM中传代培养。
(4)、当细胞密度达到1×106到3×106细胞/ml(接种后4到6天),在100%SFM培养基中传代培养。
(5)、每隔3到5天,当细胞密度达到1×106到3×106细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。
建议备份前一次混合培养的培养物,直到每一次细胞适应了新的混合培养基。每一次减少血清前,可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代。
在适应过程中,不要让细胞生长过度。这将增加选择亚群的可能性。需要注意,与有血清培养基相比,大部分SFM包含非常少的蛋白质,因而更易于受外界因素的影响。
上一篇:
RT-qPCR原理的主要步骤分述
下一篇:
检测elisa试剂盒是否可以直接检测标本试验
若网站内容侵犯到您的权益,请通过网站上的联系方式及时联系我们修改或删除