氨乙基咔唑(AEC)产生红色产物,其敏感性低于DAB,但可用于DAB反应产生较高背景或要求改变产物颜色的实验。此产物可溶于醇,但不溶于水。
1、需要的溶液和特殊设备
0.4% AEC用 N,N—二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L乙酸钠缓冲液(pH5.2),过氧化氢, Gelvatol或Mowiol,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。
2、 操作步骤
(1) 用 l mL DMF溶解 4 mg AEC。AEC在DMF中稳定,因此,可以用100 mL DMF溶解0.4 g AEC作为贮存液备用;
(2) 加 l mL AEC溶液至15 mL 0.1 mol/L的乙酸钠缓冲液(pH5.2)中,并搅拌;
(3) 加0.15 mL 3%过氧化氢于水中。过氧化氢一般是30%的溶液提供,在4℃可存放1个月;
(4) 用滤纸过滤;
(5) 加此溶液到标本中,并于室温孵育10~40 min,水洗终止反应;
(6) 优化:如果需要复染,只可用水溶性染料;
(7) 用Gelvatol或Mowiol封片。