八种抗体概述:
1、流式抗体
流式抗体是经过流式实验验证的,一般是针对单一种属的直接带荧光标记的单克隆抗体,检测的是单细胞悬液,结果通过流式细胞仪分析。
2、免 疫荧光抗体
免 疫荧光抗体是经过免 疫荧光实验验证的单克隆或者多克隆抗体,抗体通常情况下一般不带标记,通过FITC、CY3等荧光标记二抗显色,结果通过荧光显微镜观察。
3、免 疫组化抗体
免 疫组化抗体是经过免 疫组化实验验证的单克隆或者多克隆抗体,抗体通常情况下一般不带标记,通过酶标二抗催化底物显色,结果通过普通光学显微镜观察。
4、荧光标记抗体
荧光标记抗体一般指的是带FITC、CY3等荧光标记的二抗,用于免 疫荧光实验中识别对应的一抗,或者FITC、CY3标记的荧光一抗,可用于流式或免 疫荧光实验,只有经过流式验证的荧光抗体才能称为流式抗体。
5、普通抗体
普通抗体一般指不带标记的单克隆或者多克隆抗体,反应性和应用一般较广,能做多个种属的多种实验应用,后实验结果的观察需要依赖酶催化底物显色或者发出荧光后检测,或者FITC、CY3等荧光标记的二抗发出荧光检测。
6、封闭抗体
封闭抗体是流式实验中用于特异性封闭细胞表面Fc受体的,不带荧光标记的纯抗,如检测小鼠的细胞样本,封闭抗体为Purified Anti-Mouse CD16/32 Monoclonal Antibody。封闭抗体的作用是减少流式抗体染色过程中的非特异性染色,如果需检测的是某些表面表达FC受体较丰富的细胞,如巨噬细胞,染色前必须使用封闭抗体。
7、WB抗体
WB抗体是经过WB实验验证的单克隆或者多克隆抗体,抗体上面一般不带标记,通常情况下是通过HRP酶标二抗催化底物ECL发出荧光,通过曝光后显出条带。
8、二抗
二抗一般不能直接识别到抗原,需要通过结合能识别目标蛋白的一抗间接偶联到目标蛋白上。针对不同的实验应用类型,二抗上面可以选择不同的标记,如做WB和IHC实验,通常情况下选择带HRP酶的二抗,做IF实验,一般选择带FITC、CY3等荧光基团的二抗,也有些二抗标记biotin,biotin自身并不带荧光集团,也不能催化底物显色或者发出荧光,因此选择biotin标记的二抗,还需要选择HRP酶或者荧光标记的链霉亲和素偶联到生物素上,进一步反应才能检测到目标蛋白。