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产品资料

嗜吞噬细胞无形体PCR检测试剂盒

嗜吞噬细胞无形体PCR检测试剂盒
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:嗜吞噬细胞无形体PCR检测试剂盒
  • 产品型号:FS-P63566
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
嗜吞噬细胞无形体PCR检测试剂盒注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品描述

实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
参数规格:
产品名称:嗜吞噬细胞无形体PCR检测试剂盒
产品规格:50T
产品货号:FS-P63566
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加)

马兜铃酸A去甲基代谢产物 Aristolochic Acid Ia 38965-71-8 质量规格:美国进口

非洛地平(标准品) Felodipine 72509-76-3 质量规格:>98%,标准品用于含量测定

 载玻片细胞βCOLLAGEN II蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

(S)-普拉克索二盐酸化物 (S)-Pramipexole Dihydrochloride 104632-25-9 质量规格:美国进口

 组蛋白H2B-K12乙酰化检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次等

加巴喷丁-内酰胺 Gabapentin-lactam 64744-50-9 质量规格:美国进口

线虫乙烷亚硝基脲(ENU)诱导突变试剂盒 进口/国产 规格:10次

美洛昔康(标准品) Meloxicam 71125-38-7 质量规格:HPLC>98%,标准品

石蜡切片组织CDK3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

冰冻切片组织NF KAPPA B P50蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

SB3-18 SB3-18 13177-41-8 质量规格:BR

4,4'-双甲氧基三苯甲基氯 DMT-CL 40615-36-9 质量规格:>97%

氘代盐酸(5g ) Deuterium Chloride 7698-05-7      质量规格:D, 99.5%  DCL 35% IN D2O

体液酸性磷酸酶总活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

 P38蛋白表达西方杂交分析试剂盒 进口/国产 规格:5次

水稻样品处理试剂盒 进口/国产 规格:20次

嗜吞噬细胞无形体PCR检测试剂盒沙门氏显色培养基 英文名称:Salmonella Chromogenic Medium 产品规格:1000(ML) 产品用途:用于沙门氏的显色培养沙门氏显亮红色用途:用于沙门氏的快速检测。用法称取本品 7.26g,加入 200ml 蒸馏水,加入添加剂 3ml,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热 3-5 分钟。冷却至 45-50℃时,倾入无平皿。

李斯特氏显色培养基 英文名称:Listera Chromogenic Medium 产品规格:1000(ML) 产品用途:用于李斯特氏的显色培养,单增李斯特氏显蓝色,外围有一不透明环李斯特氏显色培养基是高科园生物技术有限公司研制,可快速检测食品和药品中单增李斯特氏。阴性结果可在3天内检测完成。单增李斯特氏显蓝色,落周围有一不透明环。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯钠维持渗透压,琼脂是凝固剂,氯锂抑制革兰氏阴性生长,抑剂抑制除李氏外的革兰氏阳性生长。

金黄色葡萄球显色培养基 英文名称:Staphylococcus Chromogenic Medium 产品规格:1000(ML) 产品用途:用于金黄色葡萄球的显色培养,金黄色葡萄球显蓝绿色金黄色葡萄球显色培养基是公司改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中金黄色葡萄球的快速检测,24小时内出结果。金黄色葡萄球显蓝绿色落,李斯特氏显紫色,绝大多数革兰氏阴性被抑制。用法称取本品17.26g 加入200ml蒸馏水,加热完全溶解,煮沸2-3min,冷至50℃左右时,倾入无平皿,备用。贮存制备好的平板可保存2-5天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度2-8℃,注意避光保存。失效干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。操作步骤涂布法:1、按国家标准、SN标准、ISO标准或其它方法制备样品液;2、取1ml适宜稀释度的样品液加入表面干燥的金黄色葡萄球显色培养基平板中心,每个稀释度做2个平板;3、以L形玻璃棒将样品液涂布于琼脂表面,避免涂到平板边缘,将平板正置直至样品液被培养基吸收;4、平板倒置放入培养箱36±1℃培养18-24h,典型的金黄色葡萄球为凸起的蓝绿色落;5、计数平板上所有凸起的蓝绿色落。划线法:1、按国家标准、SN标准、ISO标准或其它方法制备样品液;2、取10ul-20ul样品液划线接种于已凝固好的金黄色葡萄球显色培养基平板上;3、倒置放入培养箱36±1℃培养18-24h,典型的金黄色葡萄球为凸起的蓝绿色落;注意:金黄色葡萄球镜检为革兰氏阳性球,且兔血浆凝固酶试验为阳性。

霉和酵母显色培养基 英文名称: 产品规格:1000(ML) 产品用途:用于霉和酵母的显色培养霉和酵母显色培养基是公司改良的培养基,用于霉和酵母的显色培养。于1000ml蒸馏水中,115℃高压灭20分钟备用。


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