实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：隐孢子虫PCR检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P63596
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
TRITC标记二抗（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） 进口/国产 规格：100微升
**孕烯 Etonogestrel 54048-10-1 质量规格：>98%
Metamorphosin A Metamorphosin A 157622-03-2 质量规格：>95%,BR
普拉格雷 Prasugrel 150322-43-3 质量规格：≥99.0%,BR
铽盐（terbiumIII）单链DNA荧光定量测定试剂盒 进口/国产 规格：20次
甘草酸二铵盐（标准品） Diammonium Glycyrrhizate 79165-06-3 质量规格：UV≥98%，标准品
N6-苯甲基腺苷 N6-Benzyl Adenosine 4294-16-0 质量规格：美国进口
基因拼接图谱完全分析技术试剂盒 进口/国产 规格：5次
细胞ZAP70激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） 进口/国产 规格：20次
人体Stat1基因甲基化检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
酞菁铜(II)(α-型)(>90.0%(T)) Copper(II) Phthalocyanine (α-form) 147-14-8 质量规格：>90.0%(T)
地美司钠 Dimesna 16208-51-8 质量规格：美国进口
通用型赖氨酸（lysine）含量化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
醋酸甲地孕酮-d3 Megestrol Acetate-d3 595-33-5 (unlabeled) 质量规格：美国进口
石蜡切片总胆固醇舒尔茨间接染色试剂盒 进口/国产 规格：10次
隐孢子虫PCR检测试剂盒2.5L微需氧产气包 英文名称： 产品规格：10个/包 产品用途：用于微需氧微生物的培养用途:本品为2.5L微需氧产气包，用于为微生物微需氧培养构造微需氧环境。微生物微需氧/厌氧培养需要厌氧培养袋，微需氧/厌氧产气包，氧气指示剂配套使用，才可进行试验。微需氧/厌氧培养系统：操作步骤图：注意事项：1. 2.5L微需氧培养袋建议装10个培养皿，但应不少于4个。2. 若采用大于2.5L的培养袋，应根据其体积相应的增加微需氧产气包的数量。当使用多个产气包时，不要叠放在一起。3. 微需氧培养的温度不超过45℃。储存方法：置阴凉干燥处密封保存。
350ml厌氧培养袋 英文名称： 产品规格：10个/包 产品用途：用于厌氧微生物的培养用途：本品为350ml厌氧培养袋，用于微生物的厌氧培养。微生物厌氧培养需要厌氧培养袋，厌氧产气包，氧气指示剂配套使用，才可进行试验。
SB培养基 英文名称：SB Medium 产品规格：250g 产品用途：用于基因工程大肠杆培养，营养非常丰富用途:用于基因工程大肠杆培养,营养非常丰富。用法称取本品 57.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭 15 分钟,备用。
TB培养基 英文名称：TB Medium 产品规格：250g 产品用途：用于基因工程大肠杆培养，营养丰富用途:用于基因工程大肠杆培养,营养丰富。用法称取本品 47.6g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭 15 分钟,备用。
LB琼脂（lennox） 英文名���： 产品规格：250g 产品用途：用于分子生物学中大肠杆的培养用途：用于发酵工程、基因工程和分子生物学中大肠杆的培养。成分(g/L)：胰蛋白胨 10.0酵母浸粉 5.0氯钠 5.0琼脂 15.0ph7.2±0.2 25℃用法：称取本品35.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭15min，备用。
LB肉汤（Lennox） 英文名称：LB Broth 产品规格：250g 产品用途：用于分子生物学中大肠杆培养用途:用于分子生物学中大肠杆培养。成分(g/L)胰蛋白胨 10.0酵母浸粉 5.0氯钠 5.0pH值7.3 ± 0.2 25℃用法称取本品20.0g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭15分钟,备用。
SOB培养基 英文名称：SOB Medium 产品规格：250g 产品用途：用于基因工程大肠杆培养用途:用于基因工程大肠杆培养。用法称取本品 26.6g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭 15 分钟,备用。
2×YT肉汤 英文名称：2×YT Broth 产品规格：250g 产品用途：用于基因工程大肠杆培养用途:用于基因工程大肠杆培养。用法称取本品 31.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭 15 分钟,备用。
噻孢霉素 英文名称：Cefotaxime 产品规格：1.25μg/支 产品用途：每100ml无山梨酸麦康凯琼脂基础中加入1瓶噻孢霉素每100ml无山梨酸麦康凯琼脂基础中加入1瓶噻孢霉素（1.25ug），混匀，无分装于灭试管。
三糖铁（TSI）琼脂 英文名称：TSI Agar 产品规格：250g 产品用途：生化培养基，用于肠杆科细的生化反应筛选（GB标准）用途:用于肠杆科细的生化反应筛选。成分(g/L)蛋白胨 15.0牛肉粉 3.0酵母粉 3.0氯钠 5.0月示胨 5.0乳糖 10.0葡萄糖 1.0蔗糖 10.0酚红 0.025硫酸亚铁 0.2硫代硫酸钠 0.3琼脂 12.0pH值7.4 ± 0.1 25℃用法称取本品 64.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,加热煮沸 1分钟,分装于 16mm× 150mm 试管,121℃高压灭 15分钟制成斜面长 4-5cm,底部长2-3cm。
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