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产品资料

流感嗜血杆菌PCR检测试剂盒

流感嗜血杆菌PCR检测试剂盒
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:流感嗜血杆菌PCR检测试剂盒
  • 产品型号:FS-P63608
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
流感嗜血杆菌PCR检测试剂盒注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品描述

产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
参数规格:
产品名称:流感嗜血杆菌PCR检测试剂盒
产品规格:50T
产品货号:FS-P63608
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。

实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加)

转基因玉米NK603品系基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

桑色素(标准品) Morin 480-16-0 质量规格:HPLC≥98%,标准品

β-萘氧乙酸钠(植物级) BNOA-Na, β--Naphthoxyacetic acid sodium salt 10042-71-4 质量规格:>98%,植物级

猪去氧胆酸(标准品) Hyodeoxycholic acid 83-49-8 质量规格:含量测定

30%ACRYLAMIDE-BIS(19:1)溶液 进口/国产 规格:500毫升

喹硫平二聚体杂质 Quetiapine Dimer Impurity 945668-94-0 质量规格:美国进口

2,2'-二羟基-4-甲氧基二苯甲酮(>98.0%(GC)) 2,2'-Dihydroxy-4-methoxybenzophenone 131-53-3 质量规格:>98.0%(GC)

肉桂醇(标准品) Cinnamyl alcohol 104-54-1 质量规格:HPLC≥98%,标准品

10%TWEEN 80溶液 进口/国产 规格:100毫升

朝藿定B(标准品) Epimedin B 110623-73-9 质量规格:HPLC≥98%,标准品

聚乙二醇2000 PEG 2000 25322-68-3 质量规格:M.W:2000

DL-焦谷氨酸 DL-Pyroglutamic acid 149-87-1 质量规格:0.98

L-苯丙氨酸乙酯盐酸盐 H-Phe-OEt.HCl 3182-93-2 质量规格:>98%,BR

DL-丙氨酰-DL-丙氨酸 DL-Ala-DL-Ala 2867-20-1 质量规格:0.97

大车前苷(标准品) Plantamajoside 104777-68-6 质量规格:HPLC≥98%,标准品

 冰冻切片组织组蛋白NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

流感嗜血杆菌PCR检测试剂盒LB肉汤 英文名称:LB Broth 产品规格:250g 产品用途:用于分子生物学中大肠杆的培养用途用于细增培养。成分(g/L)蛋白胨 10.0g酵母粉 5.0g氯钠 10.0gPH值 7.0±0.1用 法称取本品2.5克,溶解于100ml蒸馏水中, 121℃高压灭15分钟备用。

LB营养琼脂 英文名称:LB Nutrient Agar 产品规格:250g 产品用途:用于分子生物学中大肠杆的培养用途用于发酵工程、基因工程和分子生物学中大肠杆的培养。成分(g/L)胰蛋白胨 10.0g酵母浸粉 5.0g氯钠 10.0g琼脂 15.0gPH值 7.0±0.2用 法称取本品4克,溶解于100ml蒸馏水中, 121℃高压灭15分钟,备用。质量控制和典型特征接种10-100个大肠杆JM109、HB101在36±1℃培养18-24小时,生长明显。

苯丙氨酸脱氨酶 英文名称:Phenylalanine Deaminase Medium 产品规格:1ml*20 产品用途:用于苯丙氨酸脱氨酶试验产品用途:用于苯丙氨酸脱氨酶试验。

伊红美蓝琼脂(EMB) 英文名称:Eosin-Methylene Blue Agar 产品规格:250g 产品用途:弱选择性培养基、用于分离肠道致病,特别是大肠杆(GB、SN标准)用途弱选择性培养基,用于分离肠道致病,特别是大肠杆。成分(g/L)蛋白胨 10.0g乳糖 10.0g磷酸氢二钾 2.0g琼脂 15.0g伊红 0.4g美蓝 0.065gPH值 7.1±0.2※请放置阴凉干燥处保存用 法称取本品 3.74克,加热溶解100ml蒸馏水中,121℃高压灭15分钟,备用。质量控制和典型特征:在36±1℃培养24±2h,典型大肠杆落特征为具黑色中心有金属光泽或无光泽。

Kovacs氏靛基质试剂盒 英文名称:Kovacs's indole Box 产品规格:5ml*2 产品用途:用于吲哚(靛基质)试验Kovacs氏靛基质试剂盒说明试剂盒组成:溶液A(对二甲氨甲醛5.0g,戊醇75.0ml,浓盐酸25.0ml):5ml*2操作步骤1、纯培养物接种于1ml色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基中或其他适宜的培养基中,36±1℃培养24±2h。2、加入溶液A 2-4滴,混匀。3、立即观察结果,也可以放置室温5-10min观察结果。结果判断阳性反应:在培养基上部有一红色环。阴性反应:黄色、桔黄色或棕色。

甲基红指示剂盒 英文名称:Methyl Red Indicator Box 产品规格:5ml*2 产品用途:用于甲基红试验[使用方法]:将MR-VP生化管培养48小时,滴加5滴甲基红溶液。[结果判断]:阳性反应:红色;阴性反应:黄色。[保存]:2-8℃保存;有效期一年。

哥伦比亚MUG培养基 英文名称:Columbia- MUG Medium 产品规格:250g 产品用途:用于大肠杆的荧光检测(SN标准)用途:用于大肠杆的荧光检测。成分(g/L)特殊蛋白胨 23.0可溶性淀粉 1.0氯钠 5.0琼脂 15.0pH值7.3 ± 0.2 25℃用法称取本品 4.4g 和 0.01g MUG ,加热溶解于 100ml 蒸馏水中,121℃高压灭 15 分钟,冷至55-60℃左右时,倾入无平皿,备用。

BDS培养基 英文名称:BDS Medium 产品规格:250g 产品用途:用于培养拟杆用途:用于拟杆的分离培养。用法称取本品 43.7g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,115℃高压灭 20 分钟,冷至 50℃左右时,加入无新霉素0.5g,混匀,倾入无平皿。

葡萄糖琼脂 英文名称:Dextrose Agar 产品规格:250g 产品用途:用于细的综合生化试验(不含溴紫)产品用法:称取本品 38.52g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭 15 分钟,备用。产品用途:用于细的综合生化试验。贮存条件:请放置阴凉干燥处保存。

Andrade氏糖类肉汤 英文名称:Andrade’s Carbohydrate Broth 产品规格:250g 产品用途:用于细的糖发酵试验用途:用于细的糖发酵试验。成分(g/L)蛋白胨 10.0牛肉浸粉 3.0氯钠 10.0酸性品红 0.1pH值7.6 ± 0.2 25℃用法称取本品 23.1g ,另称取糖类或醇类(葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇按 10g 称取;其他糖类或醇类按 5g 称取),加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装试管,121℃高压灭 15 分钟,备用。注:若培养基颜色偏红,可滴加几滴 1N NaOH 溶液脱色后再高压灭。

 


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