本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：猪流行性腹泻病毒PCR检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P63676
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
莲心碱（标准品） Liensinine 2586-96-1 质量规格：HPLC≥98%，标准品
细胞氯霉素乙酰基转移酶（CAT）报告基因活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
一步法平端PCR反应液 进口/国产 规格：50次
磷脂酰丝氨酸PS（phosphatidylserine）高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶2A6（COUMARIN）活性高效液相色谱法（HPLC）定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
细胞NF KAPPA B P50蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次
环胞甙盐酸盐；盐酸环胞苷；安西他滨盐酸盐 Cyclocytidine 10212-25-6 质量规格：>98%,BR
酵母SD-LEU培养基 进口/国产 规格：100毫升
L-缬氨酰胺盐酸盐 L-Valinamide hydrochloride 3014-80-0 质量规格：>98%,BR
大观霉素（标准品） spectinomycin 1695-77-8 质量规格：效价测定
线虫果蝇转座子Mos1热休克诱导突变试剂盒 进口/国产 规格：10次
非洛地平/非氯地平 Felodipine 72509-76-3 质量规格：>98%,USP30,BR
磺溴酞钠(>98%,BR) Sulfobromophthalein disodium salt hydrate 123359-42-2 质量规格：>98%,BR
通用型血液对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
组织甲基化组蛋白H3-K9染色质沉淀分析（CHIP）试剂盒 进口/国产 规格：10次
4'-丁氧基苯乙酮(>98.0%(GC)) 4'-Butoxyacetophenone 5736-89-0 质量规格：>98.0%(GC)
猪流行性腹泻病毒PCR检测试剂盒多价蛋白胨-酵母膏（PY）培养基 英文名称：Poly Peptone Yeast Extract Medium 产品规格：250g 产品用途：用于产气荚膜梭的培养(SN标准)用途:用于产气荚膜梭糖（醇）发酵的基础培养基。成分(g/L)多价胨 20.0酵母膏 5.0氯钠 5.0pH值6.9 ± 0.1 25℃用法称取本品 30.0g,并加入 10g糖或醇,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装到螺帽试管内,每管 9ml,121℃高压灭 15 分钟,备用。
疱肉培养基基础 英文名称：Cooked Meat Medium Base 产品规格：250g 产品用途：加入牛肉粒,用于肉毒梭及厌氧梭状芽孢杆的检验(GB标准)用途:用于厌氧的增培养。成分(g/L)蛋白胨 30.0牛肉浸粉 3.0酵母浸粉 5.0可溶性淀粉 2.0葡萄糖 3.0磷酸二氢钠 5.0pH值7.0 - 7.4 25℃用法称取本品 48.0g,加入 1000ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸 1 分钟。取碎肉渣分装 15mm×150mm 试管约 2-3cm高,将上述液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约 1cm。121℃高压灭 15 分钟备用。质量控制和典型特征36±1℃培养 24-72 小时,待出现生长特征(培养液浑浊、产气、出现异味)后进行镜检和接种到分离培养基中(如铁琼脂)。反之,则报告阴性。
疱肉牛肉粒 英文名称：Dried Meat Particle 产品规格：100g 产品用途：加入疱肉基础中，配成疱肉培养基加入疱肉基础中，配成疱肉培养基
液体硫乙醇酸盐培养基 英文名称：Thiolglycollate Medium 产品规格：250g 产品用途：用于产气荚膜梭确证试验的细培养(GB.SN标准)用途:用于药品、生物制品无检测,检测好氧和厌氧。成分(g/L)酪胨(胰酶水解) 15.0酵母浸出粉 5.0葡萄糖 5.0硫乙醇酸钠 0.5L-胱氨酸 0.5氯钠 2.5刃天青 0.001琼脂 0.75pH值7.1 ± 0.2 25℃用法称取本品 29.25g,加热搅拌溶解于 1000ml 纯化水中,分装适宜容器 ,其装量与容器高度的比例应符合,培养结束后培养基氧化层 ( 粉红色 ) 不超过培养基深度的 1/2 。121℃高压灭 15 分钟迅速冷却。在供试品接种前,培养基氧化层高度不得超过培养基深度的 1/5 。否则,须经100℃水浴加热至粉红色消失( 不得超过 20 分钟 ),迅速冷却 ,只限加热一次,并应防止被污染。
卵黄琼脂培养基基础 英文名称：Egg Yolk Agar Base 产品规格：250g 产品用途：用于肉毒梭、产气荚膜梭的分离培养（GB标准）用途:用于肉毒梭、产气荚膜梭的分离培养。成分(g/L)蛋白胨 15.0牛肉粉 3.0氯钠 5.0琼脂 15.0葡萄糖 10.0pH值7.5 ± 0.1 25℃用法称取本品 48.0g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭 15 分钟 ,冷至 50℃左右时,加入 50% 卵黄乳液100ml,摇匀,倾入无平皿。
动力-硝酸盐培养基 英文名称：Power - nitrate medium 产品规格：250g 产品用途：用于产气荚膜梭的动力试验用途：于产气荚膜梭的检测。成分（g/L）蛋白胨 5.0g牛肉粉 3.0g硝 1.0g琼脂 3.0gPH值 6.9-7.1用 法称取本品 12.0 克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装后，121℃高压灭15分钟备用。
含铁牛奶培养基 英文名称：Iron milk medium 产品规格：250g 产品用途：用于产气荚膜梭的牛奶发酵试验用途:用于产气荚膜梭的牛奶发酵试验。成分(g/L)全脂奶粉 100.0硫酸亚铁 1.0用法称取本品 101.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装试管,116 ℃高压灭 10 分钟,备用。
梭鉴别琼脂（DCA） 英文名称：Differentia Clostridial Agar 产品规格：250g 产品用途：用于干燥食品盐还原梭的计数和培养用途:用于干燥食品中盐还原梭的计数。用法称取本品 43.25g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭 15 分钟,备用。
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