实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：塞内卡病毒PCR检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P63690
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
5-氟二氢嘧啶-2,4-二酮 5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione 696-06-0 质量规格：美国进口
纽莫康定B0(肺囊康定) Pneumocandin B0 135575-42-7 质量规格：>95%
反式-盐酸玉米素 trans-Zeatin hydrochloride 6025-81-6 质量规格：美国进口
坦索罗辛 tamsulosin 106133-20-4 质量规格：美国进口
重组逆转录病毒载体转染试剂盒 进口/国产 规格：10次
福辛普利钠（标准品） Fosinopril sodium 88889-14-9 质量规格：含量测定
木犀草苷(标准品) Cynaroside 1268798 质量规格：HPLC≥98%，标准品
6-OH-MTHβC高效液相色谱电化学定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
克林沙星盐酸盐 Clinafloxacin Hydrochloride 105956-99-8 质量规格：美国进口
10X通用型非变性裂解液 进口/国产 规格：适合各种细胞native蛋白
促甲状腺释放，游离酸 TRH, Free Acid 34367-54-9 质量规格：>95%,BR
达格列嗪;达格列净 Dapagliflozin 461432-26-8 质量规格：>97%，BR，生化试剂级
DHPR受体蛋白表达西方杂交分析试剂盒 进口/国产 规格：5次
芦荟苷A Aloin 1415-73-2 质量规格：>85%,BR
伐地考昔 Valdecoxib 181695-72-7 质量规格：>99%,BR
氯诺昔康 Lornoxicam 70374-39-9 质量规格：>99%
塞内卡病毒PCR检测试剂盒采样吸收液1-GVPC液体培养基 英文名称：GVPC Liquid Medium 产品规格：100g 产品用途：用于空调系统军团采样时吸收液用途:用于空调系统军团采样时吸收液。用法称取本品 26.53g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装每瓶 100ml,121℃高压灭 15 分钟,冷至 50℃左右时,每 100ml 培养基中无加入一套采样吸收液 1-GVPC 液体培养基添加剂(含 1 支多粘素 B硫酸盐 1mg、1 支万古霉素 0.05mg 和 1 支 8mg)混匀,分装无离心管,备用。
采样吸取液1-GVPC液体培养基添加剂 英文名称： 产品规格：1ml*3支/管 产品用途：每套加入100ml采样吸取液1-GVPC液体培养基中多粘素硫酸盐 1mg/支万古霉素0.05mg/支8mg/支以上每套3支
硝酸盐肉汤（还原）（军团） 英文名称： 产品规格：20支/盒 产品用途：用于军团检测用于军团检测
马尿酸钠（军团） 英文名称： 产品规格：20支/盒 产品用途：用于军团检测用于军团检测
尿素酶生化管（军团） 英文名称： 产品规格：20支 产品用途：用于军团检测用于军团检测
明胶液化生化管（军团） 英文名称： 产品规格：20支/盒 产品用途：用于军团检测用于军团检测
麦芽糖发酵管（军团） 英文名称： 产品规格：20支 产品用途：用于军团检测用于军团检测
葡萄糖发酵管(军团) 英文名称： 产品规格：20支 产品用途：用于军团检测用于军团检测
乳糖发酵管（军团） 英文名称： 产品规格：20支 产品用途：用于军团检测用于军团检测
假单琼脂基础培养基/CN琼脂 英文名称：CN Agar 产品规格：250g 产品用途：用于铜绿假单的分离培养(滤膜法)用途：用于假单胞的选择性分离培养成分明胶蛋白胨 16.0酸水解酪蛋白 10.0无水硫 10.0无水氯镁 1.4溴化十六烷基三 0.2萘啶酮酸 0.015琼脂 15.0用法秤取本品50.6g,另取甘油10ml,加热溶于1000ml蒸馏水中，分装，121摄氏度高压灭15分钟，备用。与CFC选择性培养基的区别：1、从成份上：两者相同，不同的是他们选择的抑剂不同，即添加剂的成份不同。2、从作用上：假单胞cfc选择性培养基是用来推荐分离假单胞属，比如分离洋葱假单胞，它的质控是：目标选择洋葱假单胞，非目标选择的是金葡。CN琼脂是推荐分离铜绿假单胞（又称绿脓假单胞或绿脓杆），它的质控是，目标为铜绿假单胞，非目标是变形杆，水中及有水的环境中广泛存在的铜绿假单胞。
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