本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：新城疫病毒PCR检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P63710
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
柠檬酸三铵 Ammonium citrate, tribasic 3458-72-8 质量规格：> 98%,AR
R-氯吡格雷羧酸 R-Clopidogrel Carboxylic Acid 324757-50-8 质量规格：美国进口
矮壮素(标准品) (2-Chloroethyl)trimethylammonium chloride 999-81-5 质量规格：分析标准品
2-(4-tert-丁苯基)嘧啶(>97.0%(GC)) 2-(4-tert-Butylphenyl)pyridine 524713-66-4 质量规格：>97.0%(GC)
苦玄参苷IV(标准品) Picfeltarraenin IV 184288-35-5 质量规格：HPLC≥98%,标准品
组织NADPH细胞色素C还原酶（NADPH Cytochrome C Reductase）活性高质敏感比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
肠胃活检螺旋杆（H. PYLORI）吉姆萨（GIEMSA）染色试剂盒 进口/国产 规格：50次
石蜡切片组织线粒体复合物III蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次
细胞CASPASE-3蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次
物理法冰冻切片抗原修复处理试剂盒 进口/国产 规格：50次
Δ2-头孢他啶 Δ2-Ceftazidime 217796-42-4 质量规格：美国进口
莱苞迪甙D（标准品） Rebaudioside D 63279-13-0 质量规格：HPLC≥95.50%，标准品
呋塞米（速尿） Furosemide 54-31-9 质量规格：>99%,BR
盐酸氨溴索(标准品) Ambroxol HCl 23828-92-4 质量规格：含量测定
鹰嘴豆芽素A(标准品) Biochanin A 491-80-5 质量规格：HPLC≥98%，���准品
金标准溶液（1000μg/ml） Gold standard 7440-57-5 质量规格：1000μg/ml
新城疫病毒PCR检测试剂盒沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）（2015药典） 英文名称：Sabouraud Dextrose Agar 产品规格：250g 产品用途：用于真检测用途:用于真检测。成分(g/L)动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物 10.0葡萄糖 40.0琼脂 15.0pH值 5.6±0.2 25 ℃用法称取本品 65.0g,加热搅拌溶解于 1000ml 纯化水中,121℃高压灭 15 分钟,冷却至 50℃左右时,倾入无平皿,备用 。
R2A琼脂培养基（2015药典） 英文名称：R2A Agar 产品规格：250g 产品用途：用于纯化水中落总数的测定R2A琼脂培养基用于纯化水中落总数的测定，（EP、USP、Chp标准）酵母浸出粉 0.5蛋白胨 0.5酪蛋白水解物 0.5葡萄糖 0.5可溶性淀粉 0.5磷酸氢二钾 0.3无水硫酸镁 0.024酸钠 0.3琼脂 15.0pH值7.2 ± 0.2 25℃调整PH值，使得R2A琼脂灭后的PH值为7.2±0.2。使用高压锅，121°C下高压灭15分钟。不同药典关于纯化水的微生物检测方法和质量标准中国药典【检查】 微生物限度 取本品不少于 1ml，按薄膜过滤法处理后，采用 R2A 琼脂培养基，30～35℃培养不少于 5 天，依法检查（通则 1105），每1ml 供试品中需氧总数不得过 100cfu。操作简述：除葡萄糖、琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节 pH 值使加热后在 25℃的 pH值为 7.2±0.2，加入琼脂，加热溶化后，再加入葡萄糖，摇匀，分装，灭。 R2A 琼脂培养基适用性检查试验 照通则 1105 中“计数培养基适用性检查”的胰酪大豆胨琼脂培养基的适用性检查方法进行，试验株为铜绿假单胞和枯草芽孢杆。应符合规定。USP标准在美国药典中，推荐使用0.45μm薄膜过滤法，并同时使用高营养培养基（平板计数琼脂培养基（PCA））于30-35℃培养72小时以上，和低营养培养基（R2A琼脂）于20-25℃培养96小时以上。检测标准为：≤100cfu/ml 。操作简述：（可根据实际情况调整）量取10ml充分混匀的水样，以无操作加入安装好的薄膜过滤器内，过滤。并用 pH7.0的无氯钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量为100ml,共冲洗1次。过滤后，取出滤膜，正面朝上贴于琼脂平板上。共制备 2张滤膜，一张滤膜贴于平板计数琼脂培养基平板（高营养培养基）置30℃~35℃生化培养箱中倒置培养2~3天，计数。另一张滤膜贴于R2A琼脂平板（低营养培奍基），置20℃~25℃生化培养箱倒置培养5~7天，计数。以培养基平板上落数生长较多者作为检测结果， 按比例折算为1ml纯化水中的微生物数量后报告。
胰酪大豆胨液体培养基（TSB）（2015药典） 英文名称：TSB 产品规格：250g 产品用途：一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养用途：一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养胰酪胨 17.0g 氯钠 5.0g大豆木瓜蛋白酶消化物 3.0g 磷酸氢二钾 2.5g葡萄糖（一水合/无水） 2.5g （2.3g）pH 7.3±0.2 25℃用法：称取本品30.0g，加热搅拌溶解于1000ml纯化水中，分装于试管或其他的容器中，121℃高压灭15min，备用
硫乙醇酸盐流体培养基(颗粒) 英文名称： 产品规格：250g 产品用途：用于药品、生物制品无检测,检测好氧和厌氧用途:用于药品、生物制品无检测,检测好氧和厌氧。成分(g/L)酪胨(胰酶水解) 15.0酵母浸出粉 5.0葡萄糖 5.0硫乙醇酸钠 0.5L-胱氨酸 0.5氯钠 2.5刃天青 0.001琼脂 0.75pH值7.1 ± 0.2 25℃用法称取本品 29.25g,加热搅拌溶解于 1000ml 纯化水中,分装适宜容器 ,其装量与容器高度的比例应符合,培养结束后培养基氧化层 ( 粉红色 ) 不超过培养基深度的 1/2 。121℃高压灭 15 分钟迅速冷却。在供试品接种前,培养基氧化层高度不得超过培养基深度的 1/5 。否则,须经100℃水浴加热至粉红色消失( 不得超过 20 分钟 ),迅速冷却 ,只限加热一次,并应防止被污染。规格:250g有效期: 三年
磷酸盐缓冲稀释液（ph7.2） 英文名称： 产品规格：9ml*20支 产品用途：用于样品稀释用于样品稀释
卵黄氯化钠琼脂培养基 英文名称：Egg-Yolk Salt Agar Base 产品规格：250g 产品用途：用于药品，生物制品金黄色葡萄球选择性分离用途:用于金黄色葡萄球的选择性分离培养。成分(g/650ml)蛋白胨 6.0牛肉粉 1.8氯钠 30.0琼脂 14.0pH值7.6 ± 0.1 25℃用法称取本品 51.8g,加入 650ml 蒸馏水中,121℃高压灭15 分钟,冷至 60℃左右时,以无操作加入 10% 氯钠卵黄溶液 100ml,混匀,倾入无平皿。
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