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产品资料

淋球菌PCR检测试剂盒

淋球菌PCR检测试剂盒
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:淋球菌PCR检测试剂盒
  • 产品型号:FS-P63720
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
淋球菌PCR检测试剂盒注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品描述

产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
参数规格:
产品名称:淋球菌PCR检测试剂盒
产品规格:50T
产品货号:FS-P63720
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。

实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加)

草萘胺(标准品) Napropamid 15299-99-7 质量规格:分析标准品

人体P14基因甲基化检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

INSULIN 蛋白共沉淀分析试剂盒 进口/国产 规格:5次

宾雪德拉氏绿隐色碱(>98.0%(HPLC)(T)) Bindschedler's Green Leuco Base 637-31-0 质量规格:>98.0%(HPLC)(T)

通用型牛口蹄疫(FMDV)基因检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

组织三磷酸肌醇(IP3)含量FR定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

体外RNA转录合成试剂盒 进口/国产 规格:10次

多烯紫杉醇三水(标准品) Docetaxel trihydrate 148408-66-6 质量规格:HPLC>99%,标准品

冰冻切片胶原纤维(SIRIUS RED)染色试剂盒 进口/国产 规格:50次

3-(环己氨基 )-1-丙磺酸钠(分子生物学级) CAPS, sodium salt 105140-23-6 质量规格:>99%,分子生物学级

米卡芬净钠 Micafungin sodium 208538-73-2 质量规格:>97%,BR

 EGFR 蛋白表达西方杂交分析试剂盒 进口/国产 规格:5次

细西蒙(SIMMON)柠檬酸琼脂平板 进口/国产 规格:50个

石蜡切片糖原淀粉酶(DIASTASE)法染色试剂盒 进口/国产 规格:50次

细胞基质金属蛋白酶(MMP-1)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

通用型CHIP DNA分子库构建试剂盒 进口/国产 规格:10次

淋球菌PCR检测试剂盒支原体琼脂培养基 英文名称:Mycoplasma Agar Medium 产品规格:250g 产品用途:用于支原体的分离培养用途:用于支原体的分离培养。用法称取本品 40.50g,加热溶解于 800ml 蒸馏水中,121℃高压灭 15 分钟,冷至45-50℃时,无操作加入 灭活小牛血清或马血清 200ml 和青霉素 80 万单位,混匀,倾入无平皿,备用。

支原体培养基 英文名称:Mycoplasma Medium 产品规格:250g 产品用途:用于培养支原体的基础培养基用途:用于培养支原体的基础培养基。用法称取本品 52.1g,加热溶解于 900ml 蒸馏水中,再加入 100ml 猪血清(或马血清)和 1 支抑剂(青霉素80 万单位),混匀,用 NaOH溶液(1mol/L)调 pH 值至7.8,过滤除,分装,置 -20℃保存,备用。

鸡支原体培养基基础 英文名称: 产品规格:250g 产品用途:用于培养滑液支原体及其他禽支原体用用途:用于培养滑液支原体及其他禽支原体用。用法:称取本品 47.4g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,116℃高压灭 30 分钟,冷至 45℃左右时,加入 100ml **血清、辅酶 I 0.1g、L-半胱氨酸 0.1g、精氨酸 0.4g 和青霉素 80 万单位 ( 可加入本公司的添加剂 1 瓶和马血清 100ml )。

V-J琼脂培养基(USP) 英文名称:Vogeljohnson Agar Medium 产品规格:250g 产品用途:用于金黄色葡萄球选择性分离培养用途:用于金黄色葡萄糖球的选择性分离培养。用法:Suspend 61.0g / liter.Boil the solution of solids for 1 minute. Autoclave 15min at 121°C. Cool to between 45 and 50℃,and add 20 mL of sterile potassium tellurite solution (1 in 100).Mix thorongly before dispensing.称取本品 61.0g,溶解于1000ml 蒸馏水中,煮沸一分钟,121℃高压灭 15 分钟备用。冷至45-50℃左右时,加入20ml 过滤除的 1% 亚碲溶液,混匀,倾入无平皿。

液体大豆酪蛋白消化物培养基 英文名称:SoybeanCasein Digest Medium 产品规格:250g 产品用途:用于药品无检测产品用法:称取本品30克,溶于1000ml蒸馏水中,分装于试管中,121℃高压灭15分钟备用。

甘露醇盐琼脂培养基 英文名称:MannitolSalt Agar Medium 产品规格:250g 产品用途:用于金黄色葡萄球选择性分离培养产品用法:称取本品112.5克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭15分钟,备用。

酪蛋白胨大豆卵磷脂吐温20培养基 英文名称:Casein DigestSoy LecithinPolysorbate 20 Medium 产品规格:250g 产品用途:用于药品(含防腐剂)的中和剂用途:用于样品制备的稀释液。用法Suspend 25.0g of the medium in 960 mL of water, heating in a water bath at 48-50 ℃ for about 30 minutes to effect solution. Add 40 mL of polysorbate 20. Mix, dispense as desired, and sterilize.Autoclave 15 min at 121°C.称取本品 25.0g ,溶解于 960ml 蒸馏水中, 48-50 ℃水浴加热30分钟 ,加入 40ml吐温 - 20, 混匀 ,121℃高压灭15 分钟,备用。

大豆-干酪素消化物琼脂培养基 英文名称:Tryposec Soya Agar Medium 产品规格:250g 产品用途:一种通用的营养培养基,用于1、产品用途:一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养2、产品用法:称取本品40克, 加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭15分钟备用。3、质量控制和典型特征接种10-100个大肠杆、金黄色葡萄球、沙门氏、李斯特氏,在37℃培养18-24小时应生长良好。

大豆-干酪素消化物培养基 英文名称:Tryposec Soya Modified 产品规格:250g 产品用途:用于金黄色葡萄球的MPN测定,增培养,氯钠浓度可根据需要而调整产品用途:用于金黄色葡萄球的MPN测定,增培养,氯钠浓度可根据需要而调整产品用法:称取本品3.0克,溶于100ml蒸馏水中,分装于试管中,121℃高压灭15分钟备用。

BairdParker琼脂基础 英文名称:BairdParker Agar Medium 产品规格:250g 产品用途:用于金黄色葡萄球的选择性分离培养产品用法:称取本品58.0克,加热溶解950ml蒸馏水中,分装每瓶95ml,121℃高压灭15分钟,临用时加热融化琼脂,冷至50℃左右,于每95 ml加入常温解冻的卵黄亚碲酸甲增剂5 ml,摇匀后倾入无平皿。使用前在冰箱贮存不得超过48小时。质量控制和典型特征36±1℃培养45-48小时,金黄色葡萄球的单个落呈圆形,表面光滑、凸起、湿润,直径2-3mm。灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白色)的边缘,周围绕以不透明圆(沉淀),其外常有一清晰带。

 


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