产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：人型支原体PCR检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P63726
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
赖诺普利 Lisinopril Dihydrate 83915-83-7 质量规格：>98%,二水合物可用于细胞培养
树脂法骨DNA萃取试剂盒 进口/国产 规格：20次
美他环素,甲烯土霉素(标准品) Metacycline HCl;Methacycline HCl 3963-95-9 质量规格：分析标准品
食物谷氨酸比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
冰冻切片糖原高希尔（PAS）法染色试剂盒 进口/国产 规格：50次
细胞5-羟色胺-N-乙酰基转移酶（Serotonin N-Acetyltransferase）活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
精液组分氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：50次
受精（fertilization）细胞培养液 进口/国产 规格：500毫升
壬苯醇醚（标准品） POLYETHYLENE GLYCOL MONO-4-NONYLPHENYL ETHER 26027-38-3 质量规格：含量测定
阿魏酸钠 Sodium ferulic 24276-84-4 质量规格：>99%
βAMYLOID蛋白共沉淀分析试剂盒 进口/国产 规格：5次
石蜡切片组织CASPASE-7蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次
载玻片细胞ERK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次
牛磺鹅去氧胆酸(标准品) Taurochenodeoxycholic acid 516-35-8 质量规格：HPLC≥98%，标准品
通用型人体腺病毒（adenovirus）定性检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
茶黄素(标准品) Theaflavin 1011850 质量规格：HPLC≥98%，标准品
人型支原体PCR检测试剂盒肉汤培养基D 英文名称：Broth medium D (Lactose monohydrate broth) 产品规格：250g 产品用途：用于沙门氏检验前增或大肠群检测。产品用法：称取本品 13 克，溶解于1000ml蒸馏水中， 分装试管，116℃高压灭15分钟备用。质量控制和典型特征:在36±1℃培养24±2 h，大肠群、大肠杆和发酵乳糖的细产生气体，在小倒管内有气泡；其它细无气泡。
增肉汤培养基E 英文名称：Enrichmentbroth medium E 产品规格：250g 产品用途：用于肠杆科细的增培养用途:用于肠杆科细的增培养。用法Suspend 45.0g / liter,and heat to boiling for 1 to 2 minutes. Transfer 120-ml portions to 250-ml volumetric flasks or 9-ml portions to test tubes, all being capped with cotton plugs or loose-fitting caps. Heat at 100 °C for 30 min and cool immediately.称取本品 45.0g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶每瓶120ml或分装试管 ,每管 9ml,100℃水浴加热 30 分钟 , 迅速在流动的冷水中冷却,无需高压灭。
琼脂培养基F 英文名称：Agar medium F 产品规格：250g 产品用途：用于肠道计数和肠杆科鉴别用途:用于肠道计数和肠杆科鉴别。用法Suspend 51.5g / liter.Heat to boiling, but do not heat in an autoclave. Pour onto plates.称取本品 51.5g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,煮沸不要超过 2 分钟,无需高压灭。临用时制备不得超过 3 小时。
肉汤培养基G 英文名称：Broth medium G(MacConkey broth) 产品规格：250g 产品用途：用于大肠杆、大肠群的检测用途用于大肠杆、大肠群的检测。用 法称取本品35克，加热搅拌溶解于1000ml 蒸馏水中，分装试管，并在每个试管中加一个小倒管，121℃高压灭15分钟，备用。质量控制和典型特征在35℃培养24-48h，大肠杆和大肠群在小倒管内产生气泡并使培养基颜色由紫色变成黄色。
琼脂培养基H 英文名称：Agar medium H(MacConkey agar) 产品规格：250g 产品用途：用于肠道致病的选择性分离培养。用途:用于肠道致病的选择性分离。用法称取本品 50.0g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭 15 分钟备用
肉汤培养基I 英文名称：Broth medium 产品规格：250g 产品用途：用于沙门氏选择性增培养。产品用法：称取本品 93.55 克， 溶解于1050ml蒸馏水中，加热煮沸，临用前加入20%碘液20ml ，0.5%磺绿2ml，现配现用，不宜久置。质量控制和典型特征:接种10-100个沙门氏，在37℃培养24±2 h生长明显，溶液混浊。用接种环划线接种到DHL和BS平板或其它选择性平板上。本培养基在试管底部有一层白色沉淀物。
琼脂培养基J 英文名称：Agar medium J (Deoxycholate citrate agar) 产品规格：250g 产品用途：用于沙门氏选择性分离培养用途:用于沙门氏和志贺氏的分离培养。用法称取本品 69.52g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,煮沸 1 分钟，冷至 50℃左右时,倾入无平皿,无需高压灭。
琼脂培养基K 英文名称：Agar medium K (Xylose,lysine,deoxycholate agar) 产品规格：250g 产品用途：用于沙门氏选择性分离培养产品用法：称取本品5.52g，加热搅拌溶解于100ml蒸馏水中，煮沸2分钟，冷至50℃左右时，倾入无平皿，无需高压灭。
琼脂培养基L 英文名称：Agar medium L 产品规格：250g 产品用途：用于沙门氏的选择性分离培养用途:用于沙门氏(除伤寒沙门氏和志贺氏外)的分离培养用法Suspend 58.0g / liter.Autoclave 15 min at 121°C. Cool to 45-50°C, and pour portions into sterile petri dishes. Do not store more than 1 day.称取本品 58.0g, 加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭 15 分钟,冷至 45-50℃左 右倾入无平皿。本培养基当天使用。
琼脂培养基M 英文名称：Agar medium M (Triple sugar,iron agar) 产品规格：250g 产品用途：于肠杆科细的生化反应筛选。用途用于肠杆科细的生化反应筛选。用 法称取本品64.5克,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏中,加热煮沸1分钟,分装于16mm×150mm试管，121℃高压灭15分钟。制成斜面长4-5cm,底2-3cm。质量控制和典型特征在37℃培养18-24小时，沙门氏在试管的斜面产碱，显红色；底部产酸，显黄色；产或不产，培养基变黑色或不变黑色。
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