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产品资料

B族链球菌PCR检测试剂盒

B族链球菌PCR检测试剂盒
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:B族链球菌PCR检测试剂盒
  • 产品型号:FS-P63746
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
B族链球菌PCR检测试剂盒注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品描述

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
参数规格:
产品名称:B族链球菌PCR检测试剂盒
产品规格:50T
产品货号:FS-P63746
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。

产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加)
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

磺胺甲二唑(标准品) Sulfamethizole 144-82-1 质量规格:分析标准品

盐酸依匹斯汀 Epinastine HCl 80012-44-8 质量规格:>98%,BR

多烯紫杉醇无水/多西他赛 Docetaxel anhydrous 114977-28-5 质量规格:purity>99.0%,BR

咖啡糖精(saccharin)含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

纯化线粒体II型L-3羟酰基-CoA 脱氢酶/β淀粉样蛋白结合乙醇脱氢酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

石蜡切片组织钙ATP酶PMCA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

东莨菪内酯 Scopoletin 92-61-5 质量规格:HPLC≥98%,标准品

三环唑标准溶液(100μg/ml,u=2%) Tricyclazol solution 41814-78-2 质量规格:100μg/ml,u=2%

铅标准溶液(100µg/mL,,基体:1%HNO3) Lead standard 7439-92-1 质量规格:100µg/mL,,基体:1%HNO3

1-氮杂-18-冠-6-醚(>98.0%(GC)(T)) 1-Aza-18-crown 6-Ether 33941-15-0 质量规格:>98.0%(GC)(T)

DNA产物去铁纯化试剂盒 进口/国产 规格:20次

酵母SD-URA培养基(半乳糖+棉籽糖) 进口/国产 规格:100毫升

次野鸢尾黄素(标准品) Irisflorentin 41743-73-1 质量规格:HPLC≥98%,标准品

盐酸丁螺环酮(标准品) Buspirone Hydrochloride 33386-08-2 质量规格:含量测定

铜标准溶液(1000μg/ml,基体:1.0 mol/L HNO3) Copper solution 7758-98-7 质量规格:1000μg/ml,基体:1.0 mol/L HNO3

L-谷氨酰胺 L-Glutamine 56-85-9 质量规格:>99%,BR

B族链球菌PCR检测试剂盒ATCC培养基:2693改良Dixon(mDixon) 英文名称: 产品规格:250g 产品用途:用于真培养用于真培养称取本品66.0g,另取10ml吐温40,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭15min,备用

胰胨琼脂培养基 英文名称: 产品规格:250g 产品用途:用于鱼类细病中病原的分离培养用于鱼类细病中病原的分离培养称取本品16.7g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭15min,备用

氧化亚铁硫杆培养基 英文名称:Thiobacillus Ferrooxidans Medium 产品规格:250g 产品用途:用于氧化亚铁硫杆的培养用途:用于氧化亚铁硫杆的培养。成分(g/L)硫酸铵 3.0氯钾 0.1磷酸氢二钾 0.5硝 0.01硫酸镁 0.5硫酸亚铁 44.2pH值2.0 25℃用法称取本品 48.31g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,115℃高压灭 20 分钟,备用

可溶性淀粉琼脂 英文名称:Soluble Starch Agar 产品规格:250g 产品用途:用于微生物的淀粉水解试验用途:用于微生物的淀粉水解试验成分(g/L)可溶性淀粉 10.0磷酸氢二钾 1.0硫酸镁 1.0氯钠 1.0硫酸铵 2.0碳 2.0硫酸亚铁 0.001氯锰 0.001硫酸锌 0.001琼脂 20.0pH值7.2 ± 0.2 25℃用法称取本品 37g,加入溶解于1000ml蒸馏水中 , 121℃高压灭15 分钟,备用

淀粉水解培养基 英文名称:The Hydrolysis of Starch Medium 产品规格:250g 产品用途:用于细淀粉酶试验,若用于白喉杆和链球分型鉴定,需补加羊血清5%用途用于细淀粉酶试验,若用于白喉杆和链球分型鉴定,需补加羊血清5%。成分(g/L)蛋白胨 10.0g牛肉浸粉 3.0g氯钠 5.0g可溶性淀粉 30.0g琼脂 15.0gPH值 7.6用 法称取本品 63 克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,115℃高压灭20分钟,冷至50℃左右时,倾入无平皿,备用。

硅酸盐细培养基 英文名称:Silicate Bacteria Medium 产品规格:250g 产品用途:用于利用硅酸盐的微生物的分离培养用途用于利用硅酸盐的微生物的分离培养。成分(g/L)蛋白胨 10.0g酵母浸粉 2.0g胰酪蛋白胨 10.0g氯钠 5.0g葡萄糖 1.0g氢钠 0.1g琼脂 15.0gPH值 7.0±0.2用 法称取本品23.6克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,116℃高压灭30分钟,备用。

GVC增液 英文名称:GVC Enrichment Broth 产品规格:250g 产品用途:用于椰毒假单胞酵米面亚种的选择性增培养用途:用于椰毒假单胞酵米面亚种的选择性增培养。成分(g/L)马铃薯浸出粉 6.0葡萄糖 20.0龙胆紫 0.0001氯霉素 0.02用法称取本品 26.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装, 121℃高压灭 15 分钟,备用。

BSSA培养基 英文名称:BSSA Medium 产品规格:250g 产品用途:用于果汁中嗜酸耐热的检测用途:用于果汁中嗜酸耐热的检测。成分(g/L)酵母浸粉 2.0葡萄糖 1.0可溶性淀粉 2.0氯钙 0.25硫酸镁 0.5硫酸铵 0.2磷酸二氢钾 3.0硫酸锌 0.00018硫酸铜 0.00016硫酸锰 0.00015氯钴 0.00015 0.0001钼酸钠 0.0003pH值3.7-4.0 25℃用法称取本品 8.95g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭 15 分钟,备用。注:若加入琼脂时,琼脂与培养基分开灭之后,再混合在一起。

胰蛋白胨酵母膏葡萄糖肉汤 英文名称:Tryptone-Yeast Extract-Glucose Broth 产品规格:250g 产品用途:称取本品 20.3g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭 15 分钟,备用成分(g/L)Trypticase Peptone/胰化酪蛋白 10.0Yeast Extract/酵母膏 1.0NaCl 8.0CaCl2•2H2O 0.3Glucose/葡萄糖 1.0pH值 7.2±0.1 25℃用法称取本品 20.3g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭 15 分钟,备用。

Casman琼脂培养基 英文名称:Casman Agar Medium 产品规格:250g 产品用途:用于嗜血属的分离培养用途:用于嗜血属的分离培养。用法称取本品 42.6g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭 15 分钟,冷却至50℃时,加入 5% 脱纤维羊血和 0.15% 羊血球溶解液(洗净的羊血球一份加灭蒸馏水 2 份制成),混匀,制成血琼脂斜面或平板。

 

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