实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：弓形虫PCR检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P63778
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
乙基2-(6-氨基-2,3-二氯苄)甘氨酸(阿那格雷杂质A) Ethyl 2-(6-Amino-2,3-dichlorobenzyl)glycine(Anagrelide Impurity A) 70406-92-7 质量规格：美国进口
细血液琼脂平板 进口/国产 规格：50个
苹果酸脱氢酶(>12,000U/ml，BC) Malate dehydrogenase 9001-64-3 质量规格：>12,000U/ml，BC
通用型大肠杆（E. Coli）鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
洛沙坦钾/氯沙坦钾 Losartan Potassium 124750-99-8 质量规格：>99%,USP,BR,可用于细胞培养
2,2'-联-4-勒皮啶 2,2'-Bi-4-lepidine 7654-51-5 质量规格：
荧光素二钾 Uranine K 6417-85-2 质量规格：荧光染料
二苯并-24-冠8-醚(>98.0%(GC)) Dibenzo-24-crown 8-Ether 14174-09-5 质量规格：>98.0%(GC)
聚乙二醇10000 PEG 10000 25322-68-3 质量规格：分子量9,000~11,000
HHV6-A（HUMAN HERPESVIRUS 6-A）病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒 进口/国产 规格：2次
咽侧体抑制素Ⅳ Allatostatin IV 123338-13-6 质量规格：>95%,BR
奥利司他（发酵） Orlistat(Fermentation) 96829-58-2 质量规格：纯度≥98. 0%，含量(HPLC)(On dried basis)≥98.5%，单杂≤1.0%。
莱苞迪甙A Rebaudioside A 58543-16-1 质量规格：>98%,BR
动物组织β-半乳糖苷酶活性超敏荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
Galeterone (TOK001) TOK-001 851983-85-2 质量规格：>98%,CYP17抑制剂
细胞单胺氧化酶（MAO）总活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
弓形虫PCR检测试剂盒HBI副溶血性弧生化鉴定条(SN) 英文名称： 产品规格：5条/盒 产品用途：用于副溶血性弧的生化鉴定。(SN标准)用于副溶血性弧的生化鉴定，每条包括：无盐胨水、3%NaCl胰胨水、7%NaCl胰胨水、10%NaCl胰胨水、3%NaClVP半固体、赖氨酸脱羧酶、精氨脱羧酶、氨基酸脱羧酶对照、O/F试验(2孔)、蔗糖发酵管、42℃生长共12种生化反应。(SN标准)1、实验准备：从包装盒中取出一条生化鉴定条，打开盖子，用打孔器开孔或直接把膜撕掉。如果染或变色，则不能使用，重新拿一条。注：打孔器用75%酒精擦拭后使用。2、接种方法：从选择性琼脂平板(TCBS琼脂或弧显色培养基)上至少选取2个典型落或可疑落，每个落分别接种到无盐胰胨水、3%氯钠胰胨水、氯钠三糖铁琼脂进行鉴别试验，本生化鉴定条不含氯钠三糖铁琼脂。其它的生化管是否进行接种，请参照SN/0173-2010标准。悬液法：取一内盛2ml无盐水试管，用接种针从分离纯化平板上挑取1-2个落至无盐水中仔细研磨制成0.5麦氏浓度的均一细悬液，每孔加入100ul悬液,其中固体和半固体生化管采用穿剌接种。鸟氨酸、精氨酸、赖氨酸和氨基酸对照需加灭石蜡覆盖液面。3、接种完后做好标记，盖上盖子，放入底托中，放置36℃±1℃培养（42℃生长置42℃培养）。4、培养结束后，放在记录卡上观察。
HBIO157生化鉴定条（GB） 英文名称： 产品规格：5条/盒 产品用途：用于大肠杆0157:H7/NM生化鉴定。（GB标准）用于大肠杆0157:H7/NM生化鉴定，每条包括：山梨醇、色氨酸肉汤(蛋白胨水)、MR-VP( 2孔)、氧化酶试纸、西蒙氏枸椽酸盐、鸟氨酸、赖氨酸、氨基酸脱羧酶对照、纤维二糖、棉子糖、动力试验共12生化反应。（GB标准）使用方法：1、实验准备：从包装盒中取出一条生化鉴定条，打开盖子，用打孔器开孔或直接把膜撕掉。如果染或变色，则不能使用，重新拿一条。注：打孔器用75%酒精擦拭后使用。2、接种方法：取初步生化试验后的可疑落，划线接种到营养琼脂平板进行纯化培养(36±1℃培养18-24h)，取纯化落做氧化酶试验和接种山梨醇、靛基质(蛋白胨水)、MR-VP 2支、西蒙氏枸橼酸盐、鸟氨酸、赖氨酸、氨基酸脱羧酶对照、纤维二糖、棉子糖、半固体动力试验。请参照GB/T4789.36标准判断结果。悬液法：取一内盛2ml无盐水试管，用接种针从营养琼脂平板上挑取单个落至无盐水中仔细研磨制成均一细悬液，每孔加入100ul悬液。其中动力试验采用穿剌接种，鸟氨酸、赖氨酸和氨基酸对照需加灭石蜡覆盖液面。3、 接种完后做好标记，盖上盖子，放入底托中，放置36℃±1℃培养.4、 培养结束后，放在记录卡上观察。
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