肺吸虫PCR检测试剂盒

产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：肺吸虫PCR检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P63780
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。

实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）

5-羟基色氨酸(标准品) 5-HTP 895096 质量规格：≥98.0%,标准品,L构型

五味子醇甲(标准品) Schisandrol A 7432-28-2 质量规格：HPLC≥98%，标准品

盐酸利托君 Ritodrine HCl 23239-51-2 质量规格：>98%,BR

小量质粒抽提试剂盒 进口/国产 规格：20/50/100次

乙酸镍四水(>98%,BC) Nickel (II) acetate, tetrahydrate 6018-89-9 质量规格：>98%,BC

血液逆转录酶（REVERSE TRANSCREPTASE）活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

卡培他滨-2',3'-环状碳酸酯 Capecitabine-2',3'-cyclic Carbonate 921769-65-5 质量规格：美国进口

 冰冻切片组织IGF 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

 冰冻切片组织IL蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

庚二酸(>98%,BR) Pimelic acid 111-16-0 质量规格：>98%,BR

扑热息痛/对乙酰氨基酚 Paracetamol（Acetaminofen polvo） 103-90-2 质量规格：>98.5%,BR

组织基质金属蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

1-甲基-1,2,4-三唑 1-METHYL-1,2,4-TRIAZOLE 6086-21-1 质量规格：>98%

全反式甲酯视黄酸 all-trans Retinoic Acid Methyl Ester 339-16-2 质量规格：美国进口

PDGF-A蛋白共沉淀分析试剂盒 进口/国产 规格：5次

 GSK-3ALPHA蛋白表达西方杂交分析试剂盒 进口/国产 规格：5次

肺吸虫PCR检测试剂盒变形杆成套生化鉴定管（BXWS） 英文名称：BXWS 产品规格：13种*1套/盒*10盒 产品用途：用于变形杆的生化鉴定用于变形杆的生化鉴定每盒包括：尿素1支、苯丙氨酸酶1支、西蒙氏枸橼酸盐1支、鸟氨酸脱羧酶1支、氨基酸脱羧酶对照1支、明胶1支、脂酶(玉米油) 1支、D-甘露醇1支、色氨酸肉汤（蛋白胨水）1支、麦芽糖1支、木糖1支、水杨苷1支、七叶苷水解1支、共13种生化鉴定管并含无液体石蜡1支。

创伤弧成套生化鉴定管 英文名称： 产品规格：9种*2套/盒*5盒 产品用途：用于创伤弧生化鉴定1、实验准备：从包装盒中取出安瓿瓶，用砂轮在瓶颈上划一圈，朝易折点（瓶颈上方蓝点），反方向用力折开安瓿瓶，插入安瓿瓶试管架中。如果染或变色，则不能使用，重新拿一支。2、接种方法：从选择性琼脂平板(mCPC或CC平板)上挑取三个或以上可疑落，划线接种到3%氯钠胰蛋白胨大豆琼脂平板进行纯化培养(36±1℃培养18-24h)，取纯化落做氧化酶试验和接种3%氯钠三糖铁琼脂、嗜盐性试验、3%氯钠赖氨酸脱羧酶、3%氯钠氨基酸脱羧酶对照、3%氯钠V-P半固体和3%氯钠ONPG。本成套生化鉴定管不含3%氯钠三糖铁琼脂。请参照标准操作程序判断结果。直接接种：用接种针从平板上挑取已纯化培养的同一落接种于需要试验的生化管中。悬液法：取一内盛2ml无水或无盐水试管，用接种针从纯化培养的平板上挑取单个落至无水中仔细研磨制成0.5麦氏浊度的均一细悬液，滴入需要试验的试管中，每管3滴。其中固体和半固体生化管采用穿剌接种。接种完后放37℃培养。

变形杆成套生化鉴定管（SN） 英文名称： 产品规格：13种/盒*10 产品用途：变形杆成套生化鉴定管（SN）变形杆成套生化鉴定管（SN）组成：苯丙氨酸脱羧酶1支、尿素酶1支、明胶生化管1支、西蒙氏枸橼酸盐1支、鸟氨酸脱羧酶肉汤1支、色氨酸肉汤1支、氨基酸脱羧酶对照1支、木糖1支、麦芽糖 1支、肌醇1支、甘露醇1支、核糖醇1支、1支、无液体石蜡1支。

大肠杆成套(新国标) 英文名称： 产品规格：4种*4套 产品用途：用于大肠杆成套生化鉴定用于大肠杆鉴定

SIM生化管 英文名称： 产品规格：20支/盒 产品用途：用于单增李斯特氏的生化用途：用于单增李斯特氏的生化。

0.4mg无硫代硫酸钠水溶液 英文名称： 产品规格：0.4mg/支*20 产品用途：添加在水样采集袋里使用添加在水样采集袋里使用致泻大肠埃希氏生化套装

致泻大肠埃希氏生化套装 英文名称： 产品规格：8种*2套/盒 产品用途：用于致泻大肠埃希氏生化鉴定。用于致泻大肠埃希氏生化鉴定。

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