本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：登革热病毒通用型(DFV-U)PCR检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P64064
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
盐酸托莫西汀(标准品) Atomoxetine HCl 82248-59-7 质量规格：HPLC>99%,标准品
脱氢乙酸(>98%，BR) Dehydroacetic acid 520-45-6 质量规格：>98%，BR
石蜡切片脂质过氧化物异构前列腺素（ISOPROSTANE）荧光染色试剂盒 进口/国产 规格：10次
盐酸小檗胺（标准品） Berbamine hydrochloride 6078-17-7 质量规格：HPLC≥98%，标准品
细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 进口/国产 规格：100/250次
葡萄糖一6一磷酸脱氢酶（G6PD）定量检测试剂盒 进口/国产 规格：50次
冰冻切片组织BAX蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次
肌苷-5'-三磷酸三钠盐 ITP•Na3 35908-31-7 质量规格：>95%,BR
地生兰（terrestrial）播种培养基 进口/国产 规格：500毫升溶液/片剂
精子活力和顶体反应三色（triple staining）染色试剂盒 进口/国产 规格：50次
细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE) CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester 150347-59-4 质量规格：≥90%，用于荧光标记
细胞αSMA蛋白表达荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：10/50 次
S-乙酰基硫代碘化胆碱(>99%,医药级) S-Acetylthiocholine iodide 1866-15-5 质量规格：>99%,医药级
BOC-D-缬氨酸 Boc-D-Val-OH 22838-58-0 质量规格：>98%,BR
动物组织N-乙酰转移酶2（NAT2）活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
4'-丁基苯乙酮(>97.0%(GC)) 4'-Butylacetophenone 37920-25-5 质量规格：>97.0%(GC)
登革热病毒通用型(DFV-U)PCR检测试剂盒DKK1 抑蛋白DKK1抗体 规格: 0.2mlphospho-MAP4K4(Ser801) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体 规格: 0.1ml
EBNA 3B EB病毒核抗原-3B抗体 0.2mlOSGIN1 氧化应激诱导生抑制因子1抗体 规格: 0.2ml
NFAT5 活化T细胞核因子5蛋白抗体 规格: 0.2mlGLCNE GLCNE蛋白抗体 规格: 0.2ml
phospho-ATG16A(Ser213) 磷酸化自噬相关蛋白16A抗体 规格: 0.1mlDNAPK/PRKDC DNA依赖蛋白激酶催化亚基抗体 规格: 0.2ml
Shh Shh信号转导通路膜蛋白受体抗体 规格: 0.1mlBTBD3 BTB/POZ结构域蛋白3抗体 规格: 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG/APC APC标记的小鼠抗羊IgG 规格: 0.1mlRabbit Anti-human IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗人IgM 规格: 0.1ml
CD109 转化生因子β1结合蛋白抗体 规格: 0.1mlC4orf44 4号染色体开放阅读框44抗体 规格: 0.2ml
PSMD7 蛋白酶调解因子7抗体 规格: 0.2mlPhospho-Smad1(Ser206) 磷酸化细胞信号转导分子Smad-1抗体 规格: 0.1ml
SCHAD/HADHSC 短链L-3羟烷基辅酶A脱酶抗体 规格: 0.2mlphospho-CstF64(Ser498) 磷酸化细胞分裂相关蛋白CSTF64抗体 规格: 0.1ml
NSP1/SH2D3A SH2结构域蛋白3A抗体 规格: 0.2mlC9orf86 9号染色体开放阅读框86抗体 规格: 0.2ml
Mouse anti-rabbit IgG ascites 小鼠抗兔IgG腹水 规格: 1mlHCV-NS3 丙型肝炎病毒-NS3抗体 规格: 0.1ml
ITIH4 α胰蛋白酶重链H4抗体 规格: 0.2mlCOPS2/TRIP15 甲状受体相互作用蛋白15抗体 规格: 0.2ml
SH2B1 SH2B蛋白抗体 规格: 0.2mlCARD7/NALP1 凋亡加强结构域蛋白7抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗猴IgG 规格: 0.1mlEXPB-2 植物延展素-β 规格: 1ml
TRADD 瘤坏死因子受体1相关死亡域蛋白抗体 规格: 0.1ml
LST1 细胞特异性转运蛋白1抗体 规格: 0.2ml
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